微生物鉴定中的生理生化反应 摘 要 各种微生物在代谢类型上表现出很大的差异，反映出它们具有不同的酶系和不同的生理特征，本实验通过细菌对大分子物质如淀粉、油脂的水解，糖发酵试验，甲基红实验等几个实验，分别来达到不同目的：证明不同微生物对各种有机大分子物质的水解能力不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统，掌握进行微生物大分子物质水解实验的原理和方法；了解糖发酵的原理和重要作用，掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法；了解甲基红实验的原理、意义和方法。 关键词 淀粉水解实验 油脂水解实验 糖发酵试验 甲基红实验 前 言 微生物对大分子物质如淀粉和脂肪不能直接利用，必须依靠产生的胞外酶将大分子物质水解后，才能被微生物吸收利用。胞外酶主要为水解酶，通过加水裂解大分子物质为较小化合物，使其能被运输至细胞内。如淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精、双糖和单糖，脂肪水解酶水解脂肪为甘油和脂肪酸等，这些过程均可以通过观察细菌菌落周围的物质变化来证实。如淀粉遇碘液会产生蓝色，但 细菌水解淀粉的区 域 ，用碘液测 定时 ，不会产生蓝色，表明细菌产生淀粉酶。脂肪水解后产生脂肪酸可以改 变培 养 基的微 生 物 鉴 定 中 常 用 的 生 理 生 化 反 应 --第 1页微 生 物 鉴 定 中 常 用 的 生 理 生 化 反 应 --第 1页pH，使pH降低，加入培养基的中性红指示剂会使培养基从淡红色转变为深红色，说明细胞外存在脂肪酶。 糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应，绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源，但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异，有些细菌能分解某种糖产生有机酸（如乳糖、醋酸、丙酸等）和气体（如氢气、甲烷、二氧化碳等），有些细菌只产酸不产气。例如，大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；普通变形菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖。发酵培养基含有蛋白胨、指示剂（溴甲酚紫）、倒置的德汉式小管和不同的糖类。当发酵产酸时，溴甲酚紫指示剂可由 紫 色（pH6.8 ） 转变为黄色（pH5.2）。气体产生可由倒置的德汉式小管中有无气泡来证明。 甲基红试验是用来检测由葡萄糖产生的有机酸，如甲酸、乙酸、乳酸等。当细菌代谢糖产生酸时，培养基就会变酸，使加入培养基的甲基红指示剂由橙黄色（pH6.3）变为红色（pH4.2），即甲基红反应。尽管所有的肠道微生物都能发酵葡萄糖产生酸，但这个试验在区分大肠杆菌和产气肠杆菌上仍然是很有价值...
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