电脑桌面
添加小米粒文库到电脑桌面
安装后可以在桌面快捷访问

液相色谱中缓冲液的配制VIP专享VIP免费

液相色谱中缓冲液的配制_第1页
液相色谱中缓冲液的配制_第2页
液相色谱中缓冲液的配制_第3页
缓冲液流动相可以根据下面的操作步骤配制: 1 将缓冲液药品溶解在水中制成缓冲液(溶液 A)。 2 用 pH 计确定或调节溶液 A 的 pH。 3 将一定体积(如 200ml)的有机溶剂 B 与由步骤 2 配制的溶液 A(如 800ml)混合,制成最终流动相(此处的有机相为 20%)。 4 检查最终流动相的 pH(此处为选项)。 由于测定含有有机调节剂的流动相 pH 计发生漂移,使其测定 pH 不很可靠,所以上面的步骤 4 一般只有在考察误差的主要来源时采用,大多数实验室皆略去此步骤。 步骤 1 一般是将配制缓冲液所用的两种试剂(A1 和 A2)分别按计算量先溶解在水中制成水溶液,然后再将这两种溶液按一定的比例混合得到预期 pH 的溶液 A。若在此步骤 2 中调节 pH,则可以采用溶剂 A滴定溶剂 B,也可反过来滴定,并通过 pH 计测量得到所需 pH 的最终缓冲溶液。在大多数实验室中,pH 的测量精度通常不会达到±0.05—0.1 个pH 单位,这会显著影响一些样品的分离。当HPLC 方法对pH 非常敏感时,步骤 2 只能大致确定 pH 值。 将准确称重的缓冲液配制试剂与精确体积的脱气蒸馏水混合,使其成为均一的溶液(不进一步调整pH),如此配得缓冲溶液的 pH 可以控制在非常窄得范围内(±0.02 单位),已知准确 pH 值的缓冲液浓溶液已有市售。 为了改善峰形或塔板数,有时在流动相中加入酸或碱(如三乙胺、乙酸等),如果这些添加剂并非为配制缓冲溶液时所采用得试剂,那么将这些试剂加入到流动相中后,还需重新滴加酸或碱,使流动相达到所需的 pH 值。 常用缓冲液的配制 当缓冲液被稀释或浓缩时,pH 也应不变。其 pH 值应近似恒定不变,或当其中的离解的阳离子(K+、Na+)或阴离子(Cl-、Br-)被其它种类的离子替换时。 表 1—4 中给出了响应的配制方法,平衡阳离子为 Na+,缓冲液的最终浓度为 0.1mol/l,对于其它浓度的缓冲溶液或阳离子种类(通常 K+)更好,表中的数据也可供参考。较稀的或较浓的缓冲溶液,及包含有不同阳离子的溶液,其 pH 值会与表中的数据稍有出入。在方法建立过程中,精确的流动相 pH 值往往并不重要,重要的是每次新配制的流动相的 pH 值与第一次基本相同(最好控制在± 0.02 范围内)。注意,只有当缓冲溶液的 pH 在缓冲试剂解离常数 pKIa± 1 范围内时,缓冲溶液才具有有效的缓冲容量(如乙酸盐的 pKa=4.6,其适宜的 pH 范围为 3.6—5.6)。 表 1 低pH 值(...

1、当您付费下载文档后,您只拥有了使用权限,并不意味着购买了版权,文档只能用于自身使用,不得用于其他商业用途(如 [转卖]进行直接盈利或[编辑后售卖]进行间接盈利)。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。
3、如文档内容存在违规,或者侵犯商业秘密、侵犯著作权等,请点击“违规举报”。

碎片内容

确认删除?
VIP
微信客服
  • 扫码咨询
会员Q群
  • 会员专属群点击这里加入QQ群
客服邮箱
回到顶部