重组细胞因子和蛋白-常见问题解答(FAQ) 1.PeproTech 细胞因子和蛋白产品的稳定性如何? 答:除非在产品说明书中特别注明,PeproTech 的所有产品均为冻干粉,它们在室温条件下非常稳定(至少1个月)。尽管如此,我们还是建议您在收到我们的产品后保存于-20oC,以确保蛋白100%的活性。 对于大多数蛋白,重悬后在4oC 仅能短期保存(约1周)。如想长期保存,请先配制成稀释液(其中必须含有载体蛋白,如0.1% BSA,5%HSA,或10% FBS),然后分装冻存于-20oC 或-80oC。一定要避免反复冻融,因每次冻融均会引起蛋白的部分失活。 具体、详细的重悬和溶解方法请点击查看。 2.为什么有时在管中看不到细胞因子或蛋白的冻干粉? 答: 与市场上的许多蛋白产品不同,PeproTech 的产品中均不含载体蛋白或其它添加物(如牛血清白蛋白(BSA),人血清白蛋白(HSA)和蔗糖等,并且是以最低含盐量的溶液进行冻干的,因此冻干后常常不能形成白色网架结构,而是微量的蛋白在冻干过程中沉积在管内,形成很薄或肉眼不可见的透明蛋白层。 打开管盖前,我们建议您在小离心机中快速离心20-30秒,使附着在管盖或管壁上的蛋白聚集于管底。我们的质控步骤保证每管中所含的蛋白量准确无误,虽然有时您无法看到蛋白粉末,但管中的蛋白含量仍是非常精确的。 3.ED50和u nits/mg 之间有何关联? 答: ED50为半数有效浓度,其定义是可诱导50%最大反应的细胞因子浓度,这种活性表示法仅适用于剂量反应曲线呈 S 形的细胞因子。其实,可以将 ED50的值接理解为1unit。如某种细胞因子或蛋白的ED50为1ng/ml,那么1ng/ml 即可看作是1unit。那么我们也不难理解,1mg (1x106ng) 该细胞因子或蛋白中应含1x106/1 = 106units. ED50(ng/ml)转化为units/mg 的公式如下: 4.如何确定细胞因子的种属交叉活性? 答:1) 除少数例外,大多数人类细胞因子对小鼠细胞均有活性。2) 许多小鼠细胞因子也可作用于人类细胞,但比活性可能低于对应的人类细胞因子。 3) IL-7等为数不多的人类细胞因子作用于小鼠细胞时比对应的小鼠细胞因子活性更强。4) 干扰素,GM-CSF, IL-3和 IL-4等细胞因子种属特异,对非同源细胞几乎没有活性。5) 相反,成纤维细胞生长因子(FGFs)和神经营养素(neurotrophins)高度保守,在不同动物种属细胞上均具有很好的活性。 当然,仅凭以上规律无法判断许多其它细胞因子的交叉反应活性。如您在这方面存在疑问,请与 PeproTech 中国代表处联系,电话:051...