保健食品抗氧化功能的斑马鱼检测 1 范围 本标准规定了一种保健食品抗氧化功能的快速检测方法。 本标准适用于保健食品产品、配方和原料抗氧化功能的快速检测和筛查。 有以下特征的受试物不适用于本标准的方法： ——受试物不能溶解、乳化或制备成均匀分散的悬浮液； ——受试物溶液颜色较深或不溶性颗粒，对测试的干扰无法消除； ——受试物会产生自体荧光，对测试的干扰无法消除。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 21808 化学品 鱼类延长毒性14天试验 GB 14924.2 实验动物 配合饲料卫生标准 SN/T 0476 进出口卤虫卵检验方法 NY 5073 无公害食品 水产品中有毒有害物质限量 NY 5072 无公害食品 渔用配合饲料安全限量 GB 5749 生活饮用水卫生标准 3 术语及定义 3.1 无可观察效应浓度 no observed effect concentration （NOEC） 与对照相比，对试验生物未产生显著效应的最高受试物浓度。 [来源：GB/T 21808，2.5]。 3.2 亲鱼 指用来繁殖测试所需鱼卵的成年斑马鱼。 3.3 活性氧簇 reactive oxygen species （ROS） 是含氧的化学物质，包括：O2·-、H2O2 及HO2·、·OH等，是体内氧化反应的物质基础，也是体内过氧化效应产生的根源，与人体衰老、慢性炎症、癌症等疾病的发生、发展、预防和治疗密切相关。 4 方法原理 体内的ROS水平高低是由体内活性氧产生与消除的平衡状态所决定。体内ROS水平上升时，会消耗体内抗氧化物质，如果体内抗氧化物质的合成速度慢且抗氧化酶对ROS的清除速度不够快时，就会导致脂质和蛋白的过氧化水平升高，引起衰老等跟过氧化相关的生理现象。如果受试物能够加快体内抗氧化物质的合成速度、提升抗氧化酶的活力，就能迅速消除体内产生的ROS，从而降低ROS诱发的脂质和蛋白过氧化水平，使体内活性氧产生与消除保持在一个有益于身体健康的的平衡状态。因此，ROS是一个能够更直接地反映体内体内活性氧产生与消除之间平衡状态的指标。受试物处理后体内ROS水平的降低也能直接反映受试物的抗氧化能力。 CM-H2DCFDA（5-(and-6)-chloromethyl-2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate, acetyl ester）是一种常用的ROS特异性荧光检测试剂，将CM-H2DCFDA加入养有斑马鱼的水体之后，CM-H2DCFDA会在斑马鱼体...
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