生 物 化 学 实 验 四、实验室规则• 1. 穿工作服。• 2. 严格按操作规程使用仪器设备。• 3. 实验完毕后，洗净所用器材。• 4. 每次一个实验小组 ( 轮流 ) 做清洁卫生。 五、实验报告的书写实 验 名 称•1. 目的要求 日期•2. 实验原理•3. 主要方法及仪器•4. 基本操作过程•5. 现象与绘图•6. 计算或结果•7. 意义•8. 注意事项•9. 讨论与小结•10. 思考题 实验一 分光光度法 一、实验目的： 掌握分光光度法的概念、基本原理和应用；并通过实验理解分光光度计的操作方法和步骤以及了解分光光度计的主要组成部件与工作原理。 单色光与复色光单色光 : 仅具有某一波长的光，由具有相同能量的光子所组成。复色光 : 与上相反，各种人眼可见的色光都属复色光。 γ射线x射线真空紫外近紫外可见近红外红外远红外无线电波380 － 760nm10μm －－200 － 380nm 二、分光光度法的概念 分光光度法是基于被测物质的分子对光具有选择性吸收的特性而建立起来的分析方法（也称为吸光光度法）。 在分光光度计中，将不同波长的光连续照射到一定浓度的样品溶液时，便可得出与不同的波长相对应的吸收强度。如以波长（ λ ）为横坐标，吸收强度（ A ）为纵坐标，就可绘出该物质的吸收光谱曲线。利用该曲线可以进行物质定性、定量分析。 特点• — 灵敏度高：测定下限可达 10 － 5～ 10 － 6mol/L, 10-4% ～ 10-5%– 准确度能够满足微量组分的测定要求： 相对误差 2 ～ 5 ％ （ 1 ～ 2 ％）– 操作简便快速– 应用广泛 三、分光光度法基本原理 1. 物质对光的选择性吸收 吸收 (absorption):• 一种物质呈现何种颜色，是与入射光的组成和物质本身的结构有关。溶液呈现不同的颜色是由溶液中的质点（离子或分子）对不同波长的光具有选择性吸收而引起的。 当依次将各种波长的单色光通过某一有色溶液 , 测量每一波长下有色溶液对该波长光的吸收程度 ( 吸光度 A) ，然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得到一条曲线，称为该溶液的吸收光谱。吸收光谱 可见、紫外吸收光谱示意图 物质对不同的色光能有选择性的吸收 , 即一定的物质主要吸收一定波长的光 ( 互补吸收 ) ，是因为物质本身的分子、原子都处在一定能级的运动状态，当物质吸收了光的辐射能以后，会产生能级的跃迁，产生吸收光谱。吸收光谱的产生 2. 光吸收基本定律 根据吸收光谱的特性和形状...
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