DNADNA 自动测序自动测序核酸分子杂交核酸分子杂交RNARNA 抽提纯化抽提纯化和逆转录和逆转录 -PC-PCRR载体与片段连接、载体与片段连接、感受态细胞转化感受态细胞转化细胞培养及细胞培养及细胞转染细胞转染分子生物学实验培训总分子生物学实验培训总结结质粒抽提和质粒抽提和酶切鉴定酶切鉴定重组 DNA 鉴定目的蛋白的表达及功能的研究获得目的基因DNA 重组 遗传的中心法则 19581958 年年 CrickCrick 提出以提出以 DNADNA 为中心的遗传信息的传递为中心的遗传信息的传递规律,即规律,即 DNADNA 贮存的遗传信息通过复制传给子代贮存的遗传信息通过复制传给子代 DNADNA ,,通过转录传给通过转录传给 RNARNA ,再通过翻译传给蛋白质。遗传信息传,再通过翻译传给蛋白质。遗传信息传递方向的这个规律被称为~。递方向的这个规律被称为~。DNADNARNARNA蛋白质蛋白质复制复制复制复制转录转录翻译翻译反转录反转录19701970 年年 TeminTemin 和和 BaltimoreBaltimore 发现发现 RNARNA 病毒的病毒的 RNARNA 可通过反可通过反转录(逆转录)将遗传信息传给转录(逆转录)将遗传信息传给 cDNAcDNA ,也可通过,也可通过 RNARNA 复复制或制或 RNARNA 转录传给子代转录传给子代 RNARNA ,这是对中心法则的补充。,这是对中心法则的补充。19971997 年疯牛病和朊病毒的出现,预示蛋白质也可逆向将遗传年疯牛病和朊病毒的出现,预示蛋白质也可逆向将遗传信息向信息向 DNADNA 传递。传递。?? DNA 的结构及功能 DNA 分子是由两条反向平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成的。 DNA 分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接,排在外侧,构成基本骨架,碱基排在内侧。 两条链的碱基通过氢键连接形成碱基对,其中 A与 T 配对, G 与 C 配对。 两个相邻脱氧核苷酸通过 3’ -5’ 磷酸二酯键连接。 起着贮存和传递遗传信息的作用。 RNA 的种类Category 转运核糖核酸 (transfer RNA, tRNA) 核蛋白体核糖核酸 (ribosome RNA, rRNA) 信使核糖核酸 (messenger RNA, mRNA) 转运氨基酸 与蛋白质结合形成核蛋白体 , 起装配机的作用 翻译蛋白质的模板RNA 的功能Function mRNA 的生物合成mRNA Biosynthesis 真核生物的结构基因由内含子和外显子组成,内含子的序列较长,且不编码蛋白质。 真核生物DNA 在转录过程中经剪接可将内含子部分去除,获得成熟的 mRNA 。 由于分...