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专题五血红蛋白的提取与分离VIP专享VIP免费

专题五血红蛋白的提取与分离专题五血红蛋白的提取与分离专题五血红蛋白的提取与分离专题五血红蛋白的提取与分离专题五血红蛋白的提取与分离
血红蛋白含有四条肽链 , 每条肽链环绕一个亚铁血红素基团,此基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳,血红蛋白因含有血红素而呈红色。 课题 3 血红蛋白的提取和分离专题 5 DNA 和蛋白质技术 一、基础知识 :学生活动 1:1 、分离生物大分子的基本思路是什么?2 、不同蛋白质的特性在哪些方面存在差异?3 、本课题我们将利用血红蛋白与杂质蛋白哪方面的差异进行提纯?4 、为什么不用鸡的血红细胞而用人的血红细胞作为实验材料?5 、用什么方法分离相对分子质量不同的蛋白质 ? 一、基础知识 -- 蛋白质提取和分离原理 蛋白质提取与分离的依据--蛋白质的物理化学性质:形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别。 提取分离方法凝胶色谱法 凝胶电泳法 ( 1 )原理:( 2 )材料大分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程短,流动快;小分子穿过多孔凝胶颗粒的内部,路程长,流动慢。多孔性的多糖类化合物,如葡聚糖、琼脂糖。 ( 一 ) 凝胶色谱法 ( 3 )分离过程 混合物上 柱洗脱大分子流动快小分子流动慢收 集大分子收 集小分子 洗脱:从色谱柱上端不断注入缓冲液, 促使蛋白质分子的差速流动。 ( 一 ) 凝胶色谱法 ( 一 ) 凝胶色谱法 ㈠ 凝胶色谱法(分配色谱法): 1 、什么是凝胶? 2 、什么是凝胶色谱法?学生活动 2:3 、凝胶色谱法的原理是什么?4 、请用自己的话总结出凝胶色谱法分离相对分子质量不同蛋白质的具体过程。 1 、什么是缓冲液?2 、 缓冲液的作用是什么?学生活动 3:3 、 缓冲液是如何配制的?你所学过的人体血液的缓冲物质有哪些?4 、 本实验加的是什么缓冲液?为何要加缓冲液?(二)、缓冲溶液 由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成。如 H2CO3/NaHCO3 ,醋酸 / 醋酸钠, NaH2PO4/Na2HPO4等缓冲溶液--洗脱剂组成:配制:作用:调节缓冲剂的比例,可配制不同 pH 的缓冲液。抵制外界酸碱对溶液 pH 的干扰而保持 pH 稳定。(二)、缓冲溶液 1 、什么是电泳?2 、 影响电泳迁移速度的因素有哪些?学生活动 4:4 、电泳分离各种分子的原理是什么? (三)、电泳3 、 如何消除电荷对电泳迁移速度的影响?5 、请描述电泳的过程? 2 .凝胶电泳法:( 1 )原理:不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同,在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同,导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。 影响蛋白质分子运动...

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