1/6膜法水处理实验（三）——超滤膜截留分子量测定一、实验目的（1）掌握超滤膜截留分子量测定的基本方法和途径。（2）了解不同标准溶液对膜截留性能表征的差异。（3）掌握蛋白质的测定方法。二、实验原理截留分子量是指在一定条件下，某些分子量的物质被膜截留，被截住物质的最小分子量即为膜的截留分子量，用以表征膜的分离能力。由于直接测定超滤膜的孔径相当困难，所以使用已知分子量的球状物质进行测定。如果膜对被截留物质的截留率大于 90%时，就用被截留物质的分子量表示膜的截留性能，称为膜的截留分子量。实际上，所使用的物质并非绝对的球形，由于实验条件的限制，所测定的截留率也有一定的误差。加之，膜的制备方法决定了膜孔本身的尺寸大小并不是一致，而是围绕某一中心值呈现一定的分布。因此，截留分子量并不能完全代表膜的分离能力。本实验使用紫外分光光度法测试平板超滤膜对两种不同分子量大小的蛋白质溶液的截留效果。根据透过液中蛋白质含量，计算超滤膜截留率，估算平板超滤膜孔径大小，确认平板膜的性能。实验原理如下：配制不同分子量的蛋白质溶液，分别用紫外分光光度法测试通过平板膜前后蛋白质溶液浓度的变化，计算出平板超滤膜对不同分子量蛋白质的截留率，估算膜的截留分子量。三、实验装置与设备2/6图 1 实验装置图1、自制平板膜过滤装置一套，含隔膜泵、压力表、流量计、膜组件支架等单元，如图 1 所示。2、超滤平板膜,截留分子量约为 50kDa。使用前膜片浸泡在去离子水中。3、紫外分光光度计；4、千分之一电子天平；5、PH 计；6、容量瓶、吸管、烧杯等；7、去离子水；8、卵清蛋白（分子量 45000）：卵蛋白片；9、牛血清白蛋白（分子量 67000）：生化试剂。10、氯化钠（NaCl）:分析纯；11、氯化钾（KC1）:分析纯；12、磷酸二氢钾（KH2PO4）:分析纯；13、磷酸氢二钾（K2HPO4）:分析纯；14、HCl:分析纯；四、实验步骤3/61、蛋白溶液标准曲线的绘制a、0.01M 磷酸盐缓冲溶液（PBS）的配制方法称 7.9gNaCl,0.2gKC1,0.24gKH2PO4（or1.44gNa2HPO4）和 1.8gK2HPO4,溶于 800ml蒸馏水中，用 HCl 调节溶液的 pH 值至 7.4,最后加蒸馏水定容至 1L。保存于 4°C 冰箱中即可。（PBS 的作用就是不影响蛋白质变质）需要注意的是，通常所说的浓度 0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非 Na 离子或 K 离子的浓度，Na 离子和 K 离子只是用来调节渗透压的。b、高浓度牛血清蛋白标准曲线的绘制精确称...
VIP
