第六章 核 酸 提要 一.概述核酸分类 分布与功能 二.核苷酸碱基 嘌呤与嘧啶 DNA 与 RNA 中的核苷与核苷酸 多磷酸核苷酸 环核苷酸三.DNA 的结构磷酸二酯键 DNA 的一级结构 DNA 的二级结构 DNA 的三级结构 DNA 的拓扑结构四.RNA 的结构DNA 与 RNA 的区别 RNA 的种类与功能 tRNA 的结构特点 mRNA 的结构特点五.核酸的理化性质紫外吸收 DNA 的变性与复性 限制性内切酶 第一节 概述一发现核酸占细胞干重的 5-15%,1868 年被瑞士医生 Miescher 发现,称为“核素”。在很长时间内,流行“四核苷酸假说”,认为核酸是由等量的四种核苷酸构成的,不可能有什么重要功能。1944 年 Oswald Avery 通过肺炎双球菌的转化实验首次证明 DNA 是遗传物质。正常肺炎双球菌有一层粘性发光的多糖荚膜,有致病性,称为光滑型(S 型);一种突变型称为粗糙型(R 型),无荚膜,没有致病能力(缺乏 UDP-葡萄糖脱氢酶)。1928 年,格里菲斯发现肺炎双球菌的转化现象,即将活的粗糙型菌和加热杀死的光滑型菌混合液注射小鼠,可致病,而二者单独注射都无致病性。这说明加热杀死的光滑型菌体内有一种物质使粗糙型菌转化为光滑型菌。艾弗里将加热杀死的光滑型菌的无细胞抽提液分级分离,然后测定各组分的转化活性,于 1944 年发表论文指出“脱氧核糖型的核酸是型肺炎球菌转化要素的基本单位”。其实验证据如下:1.纯化的、有高度活性的转化要素的化学元素分析与计算出来的 DNA 组成非常接近。2.纯化的转化要素在光学、超速离心、扩散和电泳性质上与 DNA 的相似。3.其转化活性不因抽取去除蛋白质或脂类而损失。4.用胰蛋白酶和糜蛋白酶处理不影响其转化活性。5.用 RNA 酶处理也不不影响其转化活性。6. DNA 酶可使其转化活性丧失。艾弗里的论文发表后,有些人仍然坚持蛋白质是遗传物质,认为他的分离不彻底,是混杂的微量的蛋白质引起的转化。1952 年,Hershey 和 Chase 的 T2 噬菌体旋切实验彻底证明遗传物质是核酸,而不是蛋白质。他们用 35S 标记蛋白质,用 32P 标记核酸。用标记的噬菌体感染细菌,然后测定宿主细胞的同位素标记。当用硫标记的噬菌体感染时,放射性只存在于细胞外面,即噬菌体的外壳上;当用磷标记的噬菌体感染时,放射性在细胞内,说明感染时进入细胞的是 DNA,只有DNA 是连续物质,所以说 DNA 是遗传物质。1956 年,Fraenkel Conrat 的烟草花叶病毒(TMV)重建实验证明,RNA ...