实验绿叶中色素的提取和分离【实验原理】1.提取：绿叶中的色素溶于有机溶剂无水乙醇而不溶于水，可用无水乙醇提取色素。2.分离：各种色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，反之则慢，从而使各种色素相互分离。【实验步骤】提取色素：称取5g绿叶，剪碎，放入研钵中，加入少量二氧化硅、碳酸钙和10mL无水乙醇→研磨→过滤→收集到试管内并塞严试管口制备滤纸条：将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长与直径的滤纸条，将滤纸条一端剪去两角，在距离剪角一端1cm处用铅笔画一条细的横线画滤液细线：用毛细吸管吸取少量的滤液，沿铅笔线均匀地画一条细线，待滤液干后，再画一两次分离色素：将适量的层析液倒入试管中，装置如图所示滤液细线层析液观察结果：滤纸条上呈现四条颜色、宽度不同的色素带，如图所示橙黄色叶黄素叶绿素a最多黄绿色1.为什么需要选用新鲜绿色的叶片做实验材料？提示：新鲜绿色的叶片中色素含量高，从而使滤液中色素含量较高，实验效果明显。2.为什么研磨时要迅速？为什么研磨时要加入少量的CaCO3和SiO2？提示：(1)叶绿素不稳定，易被破坏，因此研磨要迅速、充分，以保证提取较多的色素。(2)二氧化硅破坏细胞结构，使研磨充分。(3)碳酸钙可防止研磨过程中色素被破坏。3.色素提取液呈现淡绿色的原因可能有哪些？提示：(1)叶片颜色太浅。(2)绿叶不新鲜。(3)研磨不充分。(4)未加碳酸钙或加入量太少。(5)加入无水乙醇量太多。(6)研磨时间过长，部分叶绿素被破坏。4.为什么在制作滤纸条时，需将一端的两个角剪掉？提示：由于液面的不同位置表面张力不同，纸条接近液面时，其边缘表面的张力较大，层析液沿滤纸边缘扩散过快，从而导致色素带分离不整齐的现象。故需将插入层析液的滤纸条一端剪去两个角。5.为什么滤液细线要重复画，且线要细、直？提示：重复画线是为了增加色素的浓度，使分离出的色素带清晰分明。画线细、直是为了防止色素带之间出现重叠。6.层析时，为什么不能让滤液细线触及层析液？提示：滤纸条上的滤液细线触及(或没入)层析液，会使滤液中的色素溶解于层析液中，滤纸条上得不到色素带，使实验失败。7.滤纸条上色素带宽窄不同的原因有哪些？提示：不同种类的色素在绿叶中的含量不同，含量多的在滤纸条上呈现的色素带宽，反之色素带窄。3．实验中的注意事项及操作目的归纳过程注意事项操作目的(1)选新鲜绿色的叶片使滤液中色素含量高(2)研磨时加无水乙醇溶解色素(3)加少量SiO2和CaCO3研磨充分和保护色素(4)迅速、充分研磨防止乙醇挥发，充分溶解色素提取色素(5)盛放滤液的试管管口加棉塞防止乙醇挥发和色素氧化实验中的注意事项及操作目的归纳过程注意事项操作目的(1)滤纸预先干燥处理使层析液在滤纸上快速扩散(2)滤液细线要直、细、匀使分离出的色素带平整不重叠(3)滤液细线干燥后再画一两次使分离出的色素带清晰分明分离色素(4)滤液细线不触及层析液防止色素直接溶解到层析液中技能训练1．(2012·上海卷)下图表示叶绿体色素提取分离实验中纸层析的结果，据图判断用作实验材料的叶片颜色为()A．红色B．黄色C．绿色D．紫色解析：本题主要考查叶绿体色素提取和分离实验及滤纸条上各色素带的位置，粗细(含量)、颜色等方面的相关知识。在叶绿体色素提取和分离实验中，滤纸条上的四条色素带距点样处的距离由近及远分别是：叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素，由图可知，叶绿素含量比类胡萝卜素含量少，用作实验材料的叶片应呈黄色。B选项正确。答案：B2．(2012·海南卷)关于叶绿体色素的叙述，错误的是()A．叶绿素a和b主要吸收红光和蓝紫光B．绿叶中叶绿素和类胡萝卜素含量不同C．利用纸层析法可分离4种叶绿体色素D．乙醇提取的叶绿体色素不能吸收光能解析：本题主要考查叶绿体色素的种类、含量、吸收光的种类等方面的知识。叶绿素a、叶绿素b主要吸收红光和蓝紫光。绿叶中叶绿素约占3/4，类胡萝卜素约占1/4。利用层析液可分离叶绿体色素，提取的叶绿体色素仍可吸收光能，但叶绿体结构被破坏，导致完整的光合作用不能进行。答案：D3．(2011·江苏卷)某研究组获得了水稻的叶黄素缺失突变体。将其叶片进行了红光照射光吸收测定和色素层...
VIP
