【创新设计】-高中生物5.2多聚酶链式反应扩增DNA片段随堂达新人教版选修11．下列关于PCR的描述中，正确的是()。①PCR是一种酶促反应②引物决定了扩增的特异性③扩增DNA利用了热变性的原理④扩增的对象是氨基酸序列A．①②④B．②③④C．①③④D．①②③解析PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，在高温条件下，把DNA的双链打开，缓慢冷却后，又重新结合，需要耐高温DNA聚合酶，同时，还需要引物，从引物的3′端连接脱氧核苷酸。答案D2．下列关于DNA聚合酶催化合成DNA子链的说法中，正确的是()。A．以DNA为模板，使DNA子链从5′端延伸到3′端的一种酶B．TaqDNA聚合酶必须在每次高温变性处理后再添加C．DNA聚合酶能特异性地复制整个DNA的全部序列D．TaqDNA聚合酶是从深海生态系统中发现的解析本题主要考查了DNA聚合酶在PCR技术中的作用及特点。DNA聚合酶不能从头开始催化合成DNA，而只能从DNA单链的3′端延伸子链；TaqDNA聚合酶能耐高温，所以在反应体系中可反复利用，无需另外再添加；PCR扩增的是引物之间的固定长度的DNA序列；TapDNA聚合酶是1966年从美国黄石公园的一个热泉某种菌体内发现的。答案A3．下图所示为PCR扩增的产物，请分析此产物是哪次循环的产物()。A．第一次循环B．第二次循环C．第三次循环D．第四次循环解析本题考查PCR的过程。在PCR反应中，以引物为标记，第一次循环时，以加入的DNA为模板，两条DNA链可分别由引物Ⅰ和引物Ⅱ与其结合并在DNA聚合酶的作用下延伸，所以形成的每个DNA中只有一种引物；从第二次循环开始，上次产生的DNA分子又可作为模板参与反应，所以会形成DNA分子两端均含引物的情况，如下图所示，因此题干中所出现的情况是第一次循环的产物。答案A4．多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列问题。(1)DNA的两条链是反向平行的，通常将________的末端称为5′端，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的________开始延伸DNA链。(2)PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题，但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代，科学家从一种Taq细菌中分离到________，它的发现和应用解决了上述问题。要将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来，所用的培养基叫________。(3)PCR的每次循环可以分为________三步。假设在PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在5次循环后，反应物中大约有________个这样的DNA片段。(4)简述PCR技术的主要应用：___________________(要求至少答两项)。答案(1)磷酸基团3′端(2)耐高温的TaqDNA聚合酶选择培养基(3)变性、复性和延伸32(4)遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等课堂小结
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