指尖血、唾液与静脉血中乙基葡萄糖醛酸苷和硫酸二乙酯含量关系研究摘要:关于酒的文化在我国自古以来就存在,且源远流长。我国社会上因饮酒引发的案件以及一些事故俨然已成为了我国社会乃至世界性的严重问题,危害社会治安秩序。但是目前对于酒精技术鉴定仍是我国公检法鉴定工作中面临的问题。例如,醉酒驾驶的识别、饮酒和逃逸,以及体内酒精来源的确定。当酒精进入人体,95%-98%的摄入量是由肝脏代谢,首先氧化乙醛,然后乙酸;其余部分(2%-5%)通过最初的形式通过尿液排出。只有少量乙醇(<0.1%)与尿苷-5-二磷酸酯-葡糖醛酸结合,形成尿中排出的乙基葡糖醛酸(EtG),伴微量乙醇在肝脏代谢为硫酸乙酯(EtS),尿中排出。因为硫酸二乙酯和乙基葡糖苷酸比乙醇在体内的时间长一些,可以再在血液和唾液检测时间,他们认为是酗酒的良好指标,可以用来解决酒后驾车。当逃逸后返回案件时,无法发现判断乙醇案件的科学依据。当乙醇没有检测到血液中,它也可以被认为是乙醇摄入酒后驾车之前或之后只要一定量的乙基葡糖苷酸和硫酸二乙酯检测。因此,近年来吸引了越来越多的关注。另外乙基葡萄糖醛酸苷和硫酸二乙脂的检测结果可广泛应用于临床医学、招兵、驾驶能力测试等活动中。本论文以乙基葡萄糖醛酸苷和硫酸二乙脂含量关系为主要研究对象,建立指尖血、唾液及静脉血中的乙基葡萄糖醛酸苷和硫酸二乙脂进行检验分析,并分析三种样品中乙醇代谢物的含量关系。液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)、气相色谱-质谱(GC-MS)、高效液相色谱-四极/静电场阱质谱(UPLC-Q-Orbitrap)是测定三种分析物中葡萄糖醛酸乙酯和硫酸二乙酯的主要方法。因乙基葡萄糖醛酸苷和硫酸二乙酯的分子量都较小,因而本文主要以高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱法进行对乙基葡萄糖醛酸苷和硫酸二乙酯的检测,且对该生物样品,采用超声辅助低密度溶剂分散液微萃取,即使用密度比水小的溶剂作为萃取剂,萃取结束后萃取剂浮于样品表层,便于移取进行后续仪器分析。该方法提高了乙醇检测结果的可靠性,将有利于科学合理,有利于执法部分规范执法,使政府执法更加法治。关键词:指尖血、唾液与静脉血中;乙基葡萄糖醛酸苷和硫酸二乙酯;高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱法;含量;关系1引言乙醇(alcohol)俗称酒精,是当前许多国家滥用最为广泛的合法药物之一。关于酒的消费是与社会和健康有关的一个全球性问题。因酒精直接或间接的造成每年数百万人的死亡,占世界所有死亡人数的5.9%.在乙醇进入人体后,约90%-95%通过肝脏进行氧化代谢,其中约0.5%-1.5%经过非氧化代谢途径,合成乙基葡萄糖醛酸苷、乙基硫酸酯、乙基脂肪酸和乙基磷酸酯。这些代谢物虽然含量很少,但是形成过程中都有乙醇的直接参与,具有很高的专一性,对乙醇的检测十分重要。乙基葡萄糖醛酸苷和硫酸二乙脂是乙醇分别在UDP-葡萄糖醛酸转移酶、磺基转移酶催化下形成的。然而,当前不断受到在文献中报道和用于体内二葡糖苷酸的方法检测乙基硫酸根代谢,但由于地理和种族差异,结果不能完全施加到中国人群。目前有和硫酸二乙酯,和方法葡糖苷酸醋酸葡萄糖检测ELISA,毛细管区带电泳,气相色谱-质谱法和液相色谱法高性能-串联质谱法,液相色谱,高性能-四极地轨道阱质谱仪/静电场。但是目前的研究样品主要是毛发、血液和尿液,对于唾液、指尖血以及静脉血中的硫酸二乙酯和乙基葡萄糖醛酸苷的研究还未见报道,指尖血、唾液与静脉血中乙基葡萄糖醛酸苷和硫酸二乙酯含量关系也未见报道。因此当前对于这一方面的研究将有利于为法医学鉴定和临床检验检测提供了可靠手段,有利于提供有效的科学依据。2乙基葡萄糖醛酸苷和硫酸二乙酯含量关系分析检测方法综述2.1乙基葡萄糖醛酸苷和硫酸二乙酯概述在酒后肇事逃逸后或酒后驾车鉴定中,经常会出酒精检测的不规范以及超出酒精在体内将出限的时间范围,导致一些检测结果缺乏一些科学性,缺乏说服力。然而乙醇在人体内的代谢产物要比乙醇本身停留的时间较长,可为肇事者在酒后逃逸谎称是在开车后才喝酒的乙醇检测提供了新的方向。主要检测的是乙醇在体内的代谢物乙基葡萄糖醛酸苷和硫酸二乙酯的含量的关系。乙醇与尿苷-5'-二磷酸葡萄糖醛酸在体内结合形...