专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验分析细菌的特点：能合成脲酶，分解尿素细菌的来源：细菌的筛选：潮湿肥沃的土壤用选择培养基实验目的1、从土壤中分离出能分解尿素的细菌2、统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌问题1：怎样筛选出这样的细菌？问题2：怎样纯化培养并计数？本课题使用的培养基配方(1)培养基中氮源是________，这种培养基在功能上属于_____培养基，目的是只允许能合成______的微生物生长，其他微生物均不能生长。(2)欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用____________________________法进行接种。脲酶尿素选择稀释涂布平板法或平板划线选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。如何确定选择培养基上生长的菌落能分解尿素？如：以尿素为唯一氮源的选择培养基可以筛选分解尿素的细菌。选择培养基和鉴别培养基鉴别培养基：添加某种指示剂或化学药剂，鉴别不同种类的微生物。(1)尿素分解菌的筛选：以尿素为唯一氮源的选择培养基可以筛选分解尿素的细菌。(2)尿素分解菌的鉴别：在以尿素为唯一氮源的选择培养基中添加酚红指示剂，可以鉴别分解尿素的细菌。（P26）筛选并鉴别菌株例1不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述，不正确的是()A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素B．碳源物质也是该微生物的能源物质C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D．水是该微生物的营养要素之一B以下是某同学纯化培养土壤中分解尿素的细菌的实验过程。结合书本P24-25，你觉得实验过程中怎样才能做到无菌操作？合作探究以上方法可以对该细菌进行计数吗？取样时应注意的无菌操作：1.取土样用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要灭菌。2.应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶，塞好棉塞。3.在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作。计数方法：稀释涂布平板法或显微镜直接计数法用稀释涂布平板法计数土壤中的菌落数注意：1.试管、移液管、涂布器使用前后都要进行灭菌。2.操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2cm处。1.稀释多少倍比较合适？2.稀释后培养多长时间可以计数？3.要不要设置对照组和重复组？4.如何根据平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？合作探究保证菌落数在30～300之间，适合计数。每隔24h统计一次菌落数，将菌落数目稳定时的记录作为结果，防止遗漏。将不接种的培养基作为空白对照，并每个稀释度涂布3个平板作为重复组。见P22公式。注意：1.涂布器末端浸在盛有体积分数为70%的酒精的烧杯中，取出时要让多余的酒精滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。2.操作中注意防火！不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃酒精。土壤中分解尿素的细菌的分离和计数土壤取样选择培养试剂鉴别稀释计数特征观察1．判断下列有关微生物培养叙述的正误(1)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害()(2)在配制培养基时，除满足营养需求外，还应考虑pH、O2及特殊营养物质的需求()(3)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素()(4)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变蓝，则说明筛选到分解尿素的细菌()(5)从有机废水中分离分解有机物的微生物时，接种后的培养皿需放在光照培养箱中培养。（）√√√××课堂反馈2.科研人员利用实验室保藏的酵母及市场上出售的面包酵母菌种，设计了相关实验，成功培育出能在-20℃条件下冷冻保存56d，存活率达到90%以上的耐冻性面包酵母菌菌种。下列有关叙述错误的是()A.酵母菌能利用蛋白胨作为碳源与氮源B.在配制培养基时可选择添加适宜种类和浓度的抗生素C.应将不同来源的菌株接种到培养液后置于-20℃条件下冷冻保存56dD.应采用稀释涂布平板法和平板划线法分别测定冷冻培养前后的活菌数D
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