第四讲DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取基础知识要打牢[教材知识问题化梳理]一、1.0.14mol/LNaCl酒精二苯胺2.DNA蒸馏水不同浓度的NaCl溶液酒精蓝色二、1.热变性冷却2.(1)变性90℃(2)复性55℃左右引物(3)延伸DNA聚合酶三、1.相对分子质量的大小带电性质大小、形状2.透析用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳四、1.(1)水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏NaCl无水Na2SO4(2)压榨压榨过滤2．(1)水石油醚(2)石油醚干燥过滤(3)纸层析[效果自评组合式设计]一、(1)√(2)√(3)×(4)×(5)×(6)√(7)√(8)×(9)√(10)√(11)√二、(1)1∶4。(2)NaCl：促进油水混合物分离；Na2SO4：吸水。(3)水蒸气蒸馏法。高频考点要通关[需重点强化的2个重难点]例1：解析：选A鸡血细胞有细胞核，适于提取DNA；哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多细胞器，适于提取血红蛋白。提取血红蛋白的实验中，洗涤红细胞时，不能加清水，应该加入生理盐水，否则细胞提早释放出血红蛋白与杂质混合，加大提取难度。DNA初次析出时，加清水至黏稠物不再增加为止。洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，以利于血红蛋白的分离和纯化。例2：解析：选CPCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，其延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP和四种脱氧核苷酸。[需特别关注的1个易失分点]1．解析：(1)薄荷油挥发性强，在薄荷叶干燥过程中，会因挥发含量降低。(2)因薄荷油易溶于石油醚、酒精等有机溶剂，故用萃取法提取薄荷油，采用的溶剂为有机溶剂。(3)向通过水蒸气蒸馏得到的油水混合物中加入NaCl后，增加水的密度，就会出现油水分层现象。向分离出的油层中加入无水Na2SO4的作用是除去少量的水，用过滤的方法除去薄荷中的Na2SO4。答案：(1)鲜鲜叶比干叶的薄荷油含量高(2)有机溶剂薄荷油溶于有机溶剂，而不溶于水(3)增加水层的密度，有利于油层和水层的分离分液漏斗除去少量的水过滤解题训练要高效1．选B如果提取动物细胞中的DNA和蛋白质可以用蒸馏水涨破细胞，但是如果用植物细胞来提取DNA，那么用蒸馏水就无法涨破细胞，所以应根据细胞的结构特点选择不同的方法破碎细胞(常用的有研磨法、超声波法、酶解法等)。透析法可以将蛋白质与其他小分子化合物如无机盐、单糖、双糖、氨基酸等分离，但是不能将蛋白质与DNA分开。蛋白质和DNA都是大分子物质，皆可以用电泳的方法进行分离纯化。DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的不同而变化，当NaCl的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低，利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。2．选D生理盐水与细胞内液的浓度相等。可防止红细胞因过量吸水而涨破。在凝胶色谱法分离血红蛋白的过程中，可根据其颜色监测血红蛋白的洗脱情况。蛋白质相对分子质量越大，在凝胶色谱法分离过程中的移动速度越快。3．选A植物芳香油是有机物，利用其溶解性的特点，可用多种方法提取。若使用萃取法，原料应粉碎且干燥后浸泡于有机溶剂，然后蒸发出有机溶剂。4．选B在烘干胡萝卜颗粒时要控制好温度和时间，温度太高、干燥时间太长，会导致胡萝卜素分解；在浓缩干燥前，要将萃取液进行过滤，除去不溶物；将滤液用蒸馏装置进行蒸馏，蒸发掉有机溶剂，留下浓缩的胡萝卜素液；在萃取过程中，在瓶中安装冷凝回流装置是为了防止加热时有机溶剂挥发。5．解析：(1)DNA聚合酶只能把新的核苷酸加到已经存在的核酸的3′羟基上，与DNA母链结合的RNA引物就提供这个羟基。(2)因PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题，所以用于催化DNA复制过程的DNA聚合酶要具有耐高温的特性。用选择培养基可将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来。(3)DNA复制两条链均作为模板，进行半保留式复制，所以复制5次后得到的子代DNA分子数为25＝32个。(4)新合成的DNA链带有引物，而最初的模板DNA的两条链不带有引物。答案：(1)磷酸基团3′端(2)耐高温的TaqDNA聚合酶选择培养基(3)变性、复性和延伸32(4)•谢谢观看
