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月季花药培养VIP专享VIP免费

月季花药培养_第1页
月季花药培养_第2页
月季花药培养_第3页
花丝花药:囊状结构,内有很多花粉花粉是由花粉母细胞(小孢子母细胞)经过减数分裂减数分裂而形成的,因此,花粉是单倍体的生殖细单倍体的生殖细胞胞。花粉的发育要经历:四分体四分体时期、单核期、双核期等阶段。(一)被子植物的花粉发育(一)被子植物的花粉发育雄蕊花粉粒被子植物花粉的发育过程注意:①二核花粉粒:成熟的花粉粒中,只含花粉管细胞核和生殖细胞核。(精子在花粉管中形成,如棉花、桃、李、茶、杨、)②三核花粉粒:有些植物的花粉,在成熟前,生殖细胞进行一次有丝分裂,形成两个精子,这样的花粉在成熟时,含有一个营养核和两个精子。(如水稻、大麦、小麦、玉米、油菜等的花粉)③两个精子和一个营养核的基因型相同。④4个小孢子减分有分4个花粉管细胞核4个生殖细胞核有丝分裂8个精子1花粉母细胞(二)产生花粉植株的两种途径(二)产生花粉植株的两种途径①②移栽花药中的花粉胚状体脱分化愈伤组织花药中的花粉脱分化分化丛芽再分化丛芽诱导生根体细胞胚(胚状体):在组织培养过程中,某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构,发育过程亦与合子胚类似,被称为体细胞胚(胚状体)体细胞胚(胚状体)。人工种子又称人造种子、合成种子或无性种子,就是将组织培养所产生的体细胞胚、不定芽、顶芽、腋芽或小鳞茎等繁殖体,包裹在能提供营养的胶囊(人造胚乳)里,再在外面包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外膜(人造种皮),造成一种类似种子的结构,能在一定的条件下萌发生长,形成完整植株。(三)、影响花药培养的因素•1、材料的选择•不同植物•同一植物的不同生理状况(花期早期-初花期)•合适的花粉发育期(单核居中期与靠边期之间)•此外,植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等•2、培养基的组成1、材料的选择花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般月季的花药培养时间选在五月初到五月中旬,即月季的初花期初花期。选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素。一般来说,在单核期单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功率最高。为了挑选到单核期的花药,通常选择完全未开放的花蕾。2、培养基的组成月季花的培养基配方在1000mlMS培养基配方中添加2,4—D0.4mgKT0.2mgIAA4mg调节PH为5.8(一)材料的选择选择花药时,一般要通过镜镜检检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。最常用的方法有醋酸洋红法醋酸洋红法。但是,某些植物的花粉细胞核不易着色,需采用焙花青焙花青--铬矾法铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。(二)材料的消毒1、花蕾用70%的酒精浸泡30秒2、无菌水清洗3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4分钟(也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液)5、无菌水冲洗3~5次用于培养花药,实际上多数未熟,由于它的外面有花萼、花瓣保护,通常处于无菌状态,所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难?答:花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难。为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难?(三)接种和培养灭菌后花蕾,要在无菌条件下除去萼片和花瓣除去萼片和花瓣,并立即将花药接种花药接种到培养基上。在剥离花药时,要尽量不损伤花不损伤花药药(否则接种后,容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织),同时还要彻底去除花彻底去除花丝丝,因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。通常每瓶接种花药7-10个,温度控制在25℃左右,不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。一般经过20-30天培养后,会发现花药开裂,长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上,以便进一步分化出再生植株。如果花药开裂释放出胚状体,则一个花药内就会产生大量幼小植株,必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开,分别移植到新的培养基上,否则这些植株将很难分开。在花药培养中,特别是通过愈伤组织形成的花粉植株,常常会出现染色体倍性的染色体倍性的变化变化。(主要原因是营养核和生殖核融合造成的。)故需对培养出来的植株作进一步的鉴定和筛选。植...

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