第35卷第1期2008年北京化工大学学报JOURNALOFBEIJINGUNIVERSITYOFCHEMICALTECHNOLOGYVol.35,No.12008液相色谱测定水样中的氧氟沙星手性对映体孙小杰1,2邵兵23董慧茹1胡建英3(11北京化工大学理学院,北京100029;21北京市疾病预防控制中心,北京100013;31北京大学环境学院,北京100085)摘要:利用大赛路(CHIRALCELOD2H)手性柱对氧氟沙星对映体进行分离,考察了在流动相组分、流动相添加剂和流速对手性分离的影响。结果表明,V正己烷∶V乙醇∶V乙酸=80∶20∶015的流动相能够使氧氟沙星得到较好的分离,左氧氟沙星和右氧氟沙星的质量浓度在0125～5100μg/mL范围内线性关系良好(r2=019997)。实际水样中该方法的最低检出限左氧氟沙星为0128μg/L、右氧氟沙星为0110μg/L,最低定量限左氧氟沙星为0136μg/L、右氧氟沙星为0121μg/L。氧氟沙星的两组浓度加标平均回收率左氧氟沙星9011%和8816%、右氧氟沙星为8716%和8514%,左氧氟沙星的相对标准偏差(RSD)为512%、614%,右氧氟沙星的RSD为418%、716%(n=3)。关键词:液相色谱;手性分离;氧氟沙星中图分类号:O65717收稿日期:2007207210基金项目:国家自然科学基金国际合作重点课题(20610103);科技部国际科技合作项目(2006DFA91130)第一作者:男,1983年生,硕士生3通讯联系人E2mail:shaobingch@sina.com引言自1962年Lesher等合成第一个喹诺酮类药物萘哌酸以来,科学家们对喹诺酮类药物不断进行结构修饰,使得这一类药物得到很快的发展。目前医疗使用最为广泛的喹诺酮药物之一是氧氟沙星,它是第三代喹诺酮类药,为全合成抗菌药物[122],左氧氟沙星属于第四代喹诺酮类,是氧氟沙星(消旋体)中具有抗菌活性的左旋光学对映体。目前临床使用的为S2(-)和R2(+)两种光学异构体的混合物和S2氧氟沙星[324]。这些药物在治疗和预防各种疾病,以及延长人类和动物生命的同时,也引发了相关的环境微生物的耐药性问题。同时它能通过饮用水、食品以及其他途径传播给人,这也是继持久性污染物后的又一新兴污染物。通常使用后的氧氟沙星通过污水排放系统进入环境中,氧氟沙星的活性成分主要是S2(-)2氧氟沙星,R2(+)氧氟沙星没有抗菌活性,S2(-)和R2(+)氧氟沙星两种光学异构体在环境中的行为以及环境风险将不尽相同。因此,很有必要建立一种环境水体中氧氟沙星异构体的分析方法为研究相关的环境行为和风险评价提供技术支持。目前有关氧氟沙星的手性分离方法主要包括采用手性流动相[5]或衍生[6]的方法进行分离,尚未见利用手性固定相的高效液相色谱手性分离的研究报道,也未见针对环境样品的分析方法的报道。本文利用大赛路(CHIRALCELOD2H)手性柱,以正己烷/乙醇/乙酸为流动相对其进行了对映体分离研究。考察了不同浓度、不同种类的醇类添加剂、乙酸的含量、流速对溶质分离的影响,并初步探讨了固定相对溶质的手性分离机理。此类药物光学异构体的分离方法可行,该方法分离效果好、简便、快速、重现性好。1实验部分111主要试剂氧氟沙星,化学名称为(±)292氟22,32二氢232甲基2102(42甲基212哌嗪基)272氧代27H2吡啶并[1,2,32de]2[1,4]苯并恶嗪262羧酸(OFL),纯度9816%,Sigma公司;左氧氟沙星,纯度9811%,中国生物药品制品检定所;正己烷、甲醇,DIKMA公司;乙醇、异丙醇,ScharlauChemieSA公司;盐酸,优级纯,北京北化精细化学品有限责任公司。正己烷、甲醇、乙醇和异丙醇均为色谱纯试剂。氧氟沙星的结构式如下[627]:112样品处理取2L水样于玻璃容器中,用盐酸调节pH为3,待过WCX固相萃取柱(6mL,150mg)。WCX固相萃取柱依次用6mL甲醇、6mLpH=3的超纯水活化。上样时,用质量分数为015%甲酸的甲醇水(V甲醇∶V水=10∶90)溶液2mL进行淋洗,吹干。用6mL甲醇洗脱,氮气吹干。用流动相定容至1mL,待上机分析。113氧氟沙星的检测Waters2695高效液相色谱仪,Waters公司(美国);Waters2475荧光检测器;WatersEmpower软件系统;WCX固相萃取柱,6mL,150mg;手性柱为大赛路(CHIRALCELOD2H)手性柱,5μm,0146cm×25cm,Daicel公司(日本)。流动相为正己烷及不同比例的醇类添加剂。高效液相色谱测试的过程中,流速110mL/min,柱温40℃,进样体积20μL,激发波长278nm,发射波长465nm。用乙醇配成不同浓度的标准溶液,将乙醇、正己烷和乙酸配成所需比例(V正...
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