阳离子脂质体!"#$复合物与脂质!鱼精蛋白!"#$复合物体外细胞转染率比较%孙逊&田聆’聂宇&张志荣&(路娇&魏于全’&)四川大学华西药学院靶向药物与新型给药系统实验室*成都+&,,-&.’)四川大学华西医院人类疾病生物治疗教育部重点实验室*成都+&,,-&.摘要采用薄膜/挤压法制备空白阳离子脂质体后*再分别制得阳离子脂质体/012复合物和脂质/聚阳离子/012复合物)34546/5789:;<47=/0128457578958>?>@*3A0.B用凝胶阻滞实验*确定阳离子脂质体与质粒012的配比B用透射电镜观察阳离子脂质体/012复合物和3A0的形态*用激光粒度仪测定它们的粒径和C><;电位B用酶标仪测定它们对张氏)DE;=F.肝细胞GH>5I’肝癌细胞的转染率J结果表明阳离子脂质体/012复合物和3A0的形态均近似于球体*但3A0的粒径明显较小B3A0对张氏)DE;=F.肝细胞和H>5I’肝癌细胞的转染率均高于阳离子脂质体/012复合物J3A0是基因治疗的临床应用中一种更具前景的载体系统J关键词阳离子脂质体/012复合物脂质/鱼精蛋白/012复合物转染率KLMNOPQRSTUNVPPTRTQNRWXUYZMLTOUNUPXMSTUNTR[TZUOUYQ!"#$XUYZ\Q]QOMN^[TZT^!_LUSMYTNQ!"#$XUYZ\Q]QO‘abcdefghNihNjKTMN[TNkl#TQmhjnoMNknoTLUNkj[hpTMUjqQTmhrhMNl&)stuvwxyz{|}x~~!~"#x{$%{}&*|y}x’{z(zy)t$uyv&*wxtz*+’+&,,-&*wxyz{.’)stuvwxyz{,~u-yv{!*|y}x’{z(zy)t$uyv&*wxtz*+’+&,,-&*wxyz{.$.OSLMRS2/<>050>5;0;<47=7/:;<47=4:8457@71>@:7157@>67/0022304A5*:;<47=4:8457@71>/012:7158>?>@;=684546/5789:;<47=/012)3A0.:7158>?>@6>0>/70178;<>6*0>@5>:<48>899I>80><;06;<47=;@@;96;@>15879>6<7@>8>:<;5507504;<>0;<47@7/:;<47=4:8457@71>@<70127/8457@71>/012:7158>?>@9:E>1705E787F97/3A0;=68457@71>/012:7158>?>@6;@7;@>08>6;9<0;=@14@@47=>8>:<07=14:07@:7599:E>64;1><>0;=6@70/;:>:E;0F>7/3A0;=68457@71>/012:7158>?>@6>0>1>;@70>6;95E7<7=:700>8;<47=@5>:<07@:759)AD<.9:E>40<0;=@/>:<47=>//4:4>=:4>@4=DE;=F:>88@;=6H>5I’:>88@6>0>>8;87;<>6;9=/F;8;@@;9>4<9?<6;@/77=6/012:7158>?>@E;6;0>F78;0@5E>04:;8@70/;:>9H76>8>0*:715;0>664/012:7158>?>@*3A0E;60;0@1;88>05;0<4:8>@4C>;=617:EE4FE>0<0;=@/>:<47=>//4:4>=:94=DE;=F:>88@;=6H>5I’:>88@yz)yv$~93A0:7786;>50>5;0>6>;@48964@4C>@;=6E4FE<0;=@/>:<47=;:<484<4>@93A01;9;>;F776=7=/840;8F>=>6>848>098>E4:8>/70;5584:;<47=@4=F>=>6>848>099@QWAUL^OD;<47=4:8457@71>/012:7158>?>@34546/507<;14=>/012:7158>?>@:0;=@/>:<47=>//4:4>=:9j引言基因治疗为一些长期困扰人类的重大疾病*如恶性肿瘤G遗传病G感染性疾病的有效预防和治疗带来了希望J伴随着基因治疗而出现的基因载体研究*%国家高技术研究发展计划)B+C计划.资助项目)’,,C22’&D,&&.(通讯作者J5/1;48EC0CC8F8459@4=;9:71一直是突破其临床有效治疗的关键之一J目前*广泛使用的基因载体主要分为病毒载体系统和非病毒载体系统J非病毒载体系统因其具有使用方便G安全性高G可大规模生产和无免疫原性等优点而备受关注*其中*阳离子脂质体/012复合物是目前研究得最为广泛的非病毒载体系统G&HJ其优点在于E制备工艺简便*可运载不同大小的基因片段*可运载质粒012*还可运载染色体或细胞核*其内容量大大超过其它载体B可抵御核酸酶的作用*延缓基因降解B生物医学工程学杂志I2471>65=FJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJ’,,DB’-)&.K&L&M&LN万方数据脂质与细胞融合后!重组基因导入细胞!脂质体即被降解!磷脂可被细胞生物膜利用"目前!已有不少基因治疗的脂质体制剂进入临床试验"脂质#聚阳离子#$%&复合物’()$*!是近年来在阳离子脂质体#$%&复合物的基础上!发展起来的又一种新型非病毒载体+,-./"与阳离子脂质体#$%&复合物相比!()$能更有效地缩合$%&!因而其可能提高对细胞的转染率"这方面的研究国外报道不多!国内尚未见报道"经典的()$传递系统使用的聚阳离子是多聚赖氨酸0本文以1$&已批准可供临床使用的鱼精蛋白为聚阳离子成分!研究了()$的构建方法!并对()$和阳离子脂质体#$%&复合物对体外细胞的转染率进行了比...
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