课题课题22土壤中分解尿素的细菌土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的分离与计数专题二专题二【【课题目标课题目标】】研究培养基对微生物的选择作用,进行微生物数量的测定。【【研究对象研究对象】】土壤中能分解尿素的细菌【【达到目的达到目的】】(1)从土壤中分离出能够分解尿素的细菌(2)统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌尿素一、课题背景一、课题背景11、尿素的利用、尿素的利用尿素尿素是一种重要的是一种重要的农业氮肥。农业氮肥。尿素尿素不能直接不能直接被农被农作物作物吸收。吸收。土壤中的细菌将尿素土壤中的细菌将尿素分解成氨分解成氨之后才之后才能被植物利用。能被植物利用。22、细菌利用尿素的原因、细菌利用尿素的原因土壤中的细菌分解尿素是因为它们土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶能合成脲酶CO(NHCO(NH22))22脲酶脲酶+CO+CO22NHNH33+HH22OO33、常见的分解尿素的微生物、常见的分解尿素的微生物芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、棒状杆菌、梭状芽孢杆菌,某些真菌和放线菌棒状杆菌、梭状芽孢杆菌,某些真菌和放线菌也能分解尿素。也能分解尿素。44、课题目的、课题目的①①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌从土壤中分离出能够分解尿素的细菌②②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌一一..研究思路研究思路㈠㈠..筛选菌株筛选菌株㈡㈡..统计菌落数目统计菌落数目㈢㈢..设置对照设置对照11、实例:、实例:启示:启示:寻找目的菌种时要根据它对生存环境的寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。要求,到相应的环境中去寻找。原因:原因:因为热泉温度因为热泉温度7070~~808000CC,淘汰了绝,淘汰了绝大多数微生物只有大多数微生物只有TaqTaq细菌被筛选出来。细菌被筛选出来。DNADNA多聚酶链式反应多聚酶链式反应是是一种在体外将一种在体外将少量少量DNADNA大量复制大量复制的技术,此项的技术,此项技术要求使用技术要求使用耐高温耐高温((939300CC)的)的DNADNA聚合聚合酶。酶。㈠㈠..筛选菌株筛选菌株要分离一种微生物,必须根据该微生物要分离一种微生物,必须根据该微生物的特点,的特点,包括营养、生理、生长条件等;配置合适包括营养、生理、生长条件等;配置合适的培养基方法:的培养基方法:⑴⑴抑制大多数微生物生长抑制大多数微生物生长⑵⑵造成有利于该菌生长的环境,造成有利于该菌生长的环境,结果:结果:培养一定时间后,该菌数量上升,再通过稀培养一定时间后,该菌数量上升,再通过稀释涂布平板法等方法对它进行纯化培养分离。释涂布平板法等方法对它进行纯化培养分离。22、实验室中微生物的筛选原理:、实验室中微生物的筛选原理:人为提供有利于人为提供有利于目的菌株目的菌株生长的条生长的条件件((包括营养、温度、包括营养、温度、pHpH等等)),同时抑制或,同时抑制或阻止其他微生物生长。阻止其他微生物生长。选择培养基:选择培养基:在微生物学中,将允许特定种在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。生长的培养基。激趣应用1——为筛选菌株而配制的培养基有何特点?筛选菌株所用的培养基具有能满足需筛选微生物正常生长所需的营养物质或条件,而不利于非筛选微生物的生长。此类培养基可通过哪些方法来实现其选择作用?提示:(1)在培养基中加入某种化学物质。例如,加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌;加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在培养成分的基础上加入。(2)改变培养基中的营养成分。例如,缺乏氮源时可以分离固氮微生物;石油作为唯一碳源时,可以分离出能消除石油污染的微生物;缺乏碳源时可以分离自养微生物。(3)改变微生物的培养条件。例如,将培养基放在高温环境中培养可以得到耐高温的微生物。培养基的培养基的氮源为尿素氮源为尿素,只有能合成,只有能合成脲酶脲酶的微生物的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。才能分解尿素,以尿素...