2.2动物细胞工程2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体问境：能否采用类似“植物体细胞杂交技术”的方法，让不同种动物的体细胞进行杂交呢?1.动物细胞融合1、问：细胞融合概念、结果、过程、意义？2、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理，方法也。3、动物细胞融合常用的诱导因素有、、等。4、细胞融合技术已经成为研究细胞、细胞、肿瘤和生物培育等的重要手段。2.单克隆抗体1、问：人们为了获得抗体，传统方法如何操作？传统方法有什么缺点？2、科学发现，哺乳动物感染(如病毒、细菌等)后，体内会形成相应的细胞。B淋巴细胞能分泌，凝聚或杀死这些病原体。3、（）动物体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上，但是每一个B淋巴细胞只分泌少数几种特异性抗体。4、问：要想获得大量的单一抗体，你有何思考？5、（）在体外培养条件下，一个B淋巴细胞是可以无限增殖的。6、如何克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群。？2.1单克隆抗体的制备1、1975年，英国科学家米尔斯坦和科勒在前人工作的基础上，继续探索和尝试，并且充分发挥想像力，设计了一个极富创造性的实验方案，你能想象出“这一方案吗”2、如何使小鼠的脾细胞产生“抗羊红细胞的抗体”B淋巴细胞？3、如何将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中产生的B淋巴细胞融合？融合的目的是什么？4、骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合后，你认为有几种细胞？如何得到所要的目的细胞？5、由选择性培养得到的杂交瘤细胞，要成为“获得足够数量的能分泌所需抗体“的细胞，还须对杂交瘤细胞进行什么培养？什么检测？6、经”克隆化培养和抗体检测“的杂交瘤细胞进行怎样的培养，就产生大量的单克隆抗体？7、单克隆抗体制备的过程？8、杂交瘤细胞特点？9、单克隆抗体的优点？2.2单克隆抗体的应用1、作为诊断试剂单克隆抗体能准确地识别各种物质的细微差异，并跟一定抗原发生结合。因此，单克隆抗体在诊断的应用上，具有准确、高效、简易、快速的优点。利用的单克隆抗体，在特定的组织中成像的技术，可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。2、用于治疗疾病和运载药物1、（）单克隆抗体主要用于癌症治疗。经特定抗原注射的小鼠的效应B淋巴细胞小鼠的骨髓瘤细胞诱导融合杂交细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞选择克隆检测单克隆抗体体内培养体外培养2、（）单克隆抗体药物只能单独使用。3、生物导弹是怎么回事？基本记忆1、细胞融合概念：是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。也称细胞杂交。2、细胞融合结果：融合后形成杂交细胞。（具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞）。3、细胞融合过程：含不同DNA的细胞灭活的病毒、PEP杂交细胞4、细胞融合意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。5、要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群。6、将鼠的，骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，形成“既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体”杂种细胞。用特定的选择性培养基进行筛选培养，可以筛选出杂交瘤细胞。7、面对杂交瘤细胞，需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。8、将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，这样，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体了。9、单克隆抗体制备的过程10、杂交瘤细胞特点：既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体。9、单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、产量大。动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用途植物体细胞杂交细胞膜的流动性用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、振动、聚乙二醇（PEG）诱导克服远源杂交不亲和，获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性用胰蛋白酶使细胞分散后诱导细胞融合除应用植物细胞杂交手段外，还有用灭活病毒诱导制备单克隆抗体基础试题训练一、选择题1．（）单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞，在含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培养基（HAT）中无法生长；而小鼠脾细胞是正常细胞，在HAT培养基上可正常存活。用聚乙二醇诱导细胞融合后，经过数代培养，最终可在HAT培养基上存活...
