中国农业科学2004,37(10):1537-1543ScientiaAgriculturaSinica白果蛋白质的分离、纯化、理化特性及其抗氧化活性研究黄文,谢笔钧,王益,杨尔宁,罗锐(华中农业大学食品科学与技术学院,武汉430070)摘要:选用江苏省泰兴市大佛指白果为原料,采用盐溶和盐析的方法,从白果中分离制备出清蛋白(GAP),球蛋白(GGP)和盐溶蛋白(GSP)。白果蛋白中以清蛋白和球蛋白为主,醇溶蛋白、碱溶蛋白和复合蛋白含量很少。化学成分分析表明,制得的GAP,GGP和GSP中以GAP的蛋白质纯度高,氨基酸组成丰富、合理,属于优质蛋白质。活性试验结果表明GAP的抗氧化活性远高于GGP,关键词:白果;盐溶;盐析;清蛋白;抗氧化StudyonSeparationandPurificationofProteinfromGinkgoSeedandItsAntioxidantActivityHUANGWen,XIEBi一un,WANGYi,YANGLUORei(DepartmentFoodScienceandEngineering,HuazhongAgriculturalUniversity,Wuhan430070)Abstract:TheginkgosseedofDafozhiwereselectedandusedasexperimentalmaterials.Albumin(GAP),globulins(GGP)andsalt-solubleprotein(GSP)wereisolatedfrompreparationconditionswerestudied.Therewereginkgoseedsbysalting-inandsalting-outmethodsandtheisolationandmainlyalbuminandglobulinsinginkgoseedsalkali-solubleprotein,complexprotein.Astheresultofchemicalcompositionanalysisshown,GAPamongGAP,GGPandGSP,andtheacidscompositionofGAPwerediversityandwellcompprotein.GGP.Theresultsofscavenging-OHgeneratedbyFentonsystemshowedtheantioxidantactivityofandveryfewproclamin,wasthehighestpurityoneosed.TheyarehighqualityGAPwasmuchhigherthanKeywords:Ginkgoseed;Salting-in;Salting-out;Albumin;Antioxidant银杏为裸子植物门银杏纲银杏植物(GinkgobilbaL.),为一科一属一种的特殊植物,是我国特有的古老珍贵树种之一,素有“活化石”之称,是国家二级保护植物。银杏种实的核俗称白果,其核仁为可食用部分,由于其营养丰富,自古以来被当作养生延年的上品,而现代已成为传统的出口产品。白果作为传统的中药材已有600多年的历史,其主要药用功效为敛肺气、定喘嗽、止带浊、缩小便等。现代药理和生物活性研究结果表明,白果具有平喘、祛痰、抑制结核杆菌生长、延长表皮细胞寿命等作用;从白果中分离的轻基酚类具有抗肿瘤和抗菌作用;体内喂饲动物的试验结果还表明,白果汁具有抗衰老、抗疲劳、耐缺氧的作用。综上所述,白果具有很好的保健和预防疾病的功能,然而目前国内外的相关研究还极不深入,对其主要活性成分知之甚少。白果中含有10%以上的蛋白质,但对白果蛋白的研究几乎为空白,仅在2000年Wang和TziBunNg报道从白果中分离得到分子量为13kD的抗真菌蛋白。黄文等的研究结果表明白果蛋白具有体外抗氧化作用[1l和抗生物氧化的作用[2l。为了确定白果蛋自结构与功能之间的关系,需从白果中分离提取高活性的蛋白质,以便后续研究。提取与分离纯化的效果,通常可以根据活性蛋白的提取率、蛋白质的纯度以及样品的生物活性进行评价。如何更有效地从白果种仁中提取更多的蛋白质;收稿日期:2003-01-18基金项目:湖北省“十五”作者简介:黄文(1968-)027-87283201;攻关资助项目(2001AA204B02)仁女,Fax:广东台山人,博士,副教授,主要从事天然产物的提取分离及功能食品开发领域的研究。谢笔钧为通讯作者,Tel:027-87282966;E-mail:huangwen.mail.huza.edu.cn万方数据1538中国农业科学37卷在获得样品时,样品的蛋白质化学性质是否稳定;并且在提取过程中能否保持蛋白质的高级结构、保持蛋白质的活性,是蛋白纯化、活性研究和结构研究的关键。本文研究的主要内容是了解盐溶和盐析的条件对蛋白质提取分离的影响,从而确定一个高活性白果蛋白提取、分离纯化条件,同时对其部分理化特性及抗氧化活性进行研究。___._.r,_、A。一(A,一A,).OH抑币目举(%)=一x100%Ao1材料与方法1.1试验材料白果脱脂粉:选购江苏省泰兴地区的大佛指白果,原料经冷冻干燥后,碾碎,在低温下用石油醚脱去脂肪,待用。1.2试剂氯化钠、乙醇、Tris、硫酸钱等为国产,分析纯;2一脱氧-D一核糖为Sigma公司产品...