超高效液相色谱串联质谱分析牛乳中24种磺胺类药物残留郭伟1刘永2刘宁*1魏冬旭1，21(东北农业大学乳品科学教育部重点实验室，哈尔滨150030)2(黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心，哈尔滨150001)摘要建立同时测定牛乳中24种磺胺类药物多残留的超高效液相色谱-电喷雾串联质谱(UPLC-ESI-MS/MS)分析方法。样品经改良的QuEChERS技术提取和净化，采用ACQUITYUPLCTMBEHC18色谱柱(100mm×2.1mm，1.7μm)，0.25%乙酸水溶液和乙腈作为流动相进行梯度洗脱，超高效液相色谱分离，电喷雾离子源电离，正离子多反应监测模式进行定性和定量分析。24种药物在5～100μg/kg浓度范围内线性良好，相关系数r均大于0.99，以5，25和50μg/kg3个浓度水平进行添加回收率实验，样品的平均回收率在64.2%～110.9%之间，相对标准偏差为3.2%～13.1%，方法的检出限为0.21～1.62μg/kg。方法重现性好、灵敏度高、分析时间短、确证能力强，适用于牛乳中磺胺类药物多残留的确证检测。关键词超高效液相色谱-电喷雾串联质谱，磺胺类药物，牛乳2009-03-04收稿;2009-06-08接受本文系哈尔滨市科技攻关项目(No.2007AA6CN099)资助*E-mail:ningliu6666@yahoo.com.cn1引言磺胺类药物(SAs)是一类具有对氨基苯磺酰胺结构的抗生素总称［1］，其中疗效好、毒副作用小的有几十种，现已广泛应用于畜牧业预防和治疗细菌感染性疾病。动物源性食品(牛乳及乳制品)中磺胺类药物残留可引起人的过敏反应，重者导致急性血管性水肿、休克甚至死亡，磺胺二甲基嘧啶还表现出可能使小鼠致癌。目前，发达国家已将SAs列为动物源性食品中残留的重点监控药物。联合国食品法典委员会(CAC)和欧美等许多国家规定食品和饲料中SAs的总量以及磺胺二甲基嘧啶等单个磺胺的含量不得超过0.1mg/kg。2006年5月日本实施食品中农业化学品(农药、兽药及饲料添加剂等)残留“肯定列表制度”，规定磺胺喹噁啉的限量为0.05mg/kg，磺胺甲基嘧啶为0.02mg/kg，磺胺二甲氧嘧啶为0.04mg/kg，磺胺二甲基嘧啶为0.01mg/kg，新标准中没有规定“最大残留限量”遵从0.01mg/kg的“一律标准”。我国规定SAs的残留总量及单个SAs的最高残留量不得超过0.1mg/kg，其中牛乳中磺胺二甲基嘧啶不得超过0.025mg/kg。因此，开发一种检测种类多、灵敏度高和分析迅速的SAs多残留分析方法具有重要的现实意义。动物源性食品中SAs多残留的检测方法主要有HPLC法［2，3］、HPLC-MS/MS发［4～11］等，前处理方法多采用液液萃取和固相萃取，操作烦琐耗时。2003年，由美国农业部开发的QuEchERS快速前处理技术［12］，方法快速、简单、经济、可靠，已广泛应用于果蔬粮谷样本中农药残留检测［13～15］，但未见应用于牛乳中SAs的残留分析。本研究采用改良的QuEChERS快速前处理技术结合超高效液相色谱-电喷雾串联质谱(UPLC-ESI-MS/MS)，建立了一种同时检测牛乳中24种SAs残留的确证分析方法。2实验部分2.1仪器与试剂ACQUITYUltraPerformanceLCTM超高效液相色谱仪、QuattroPremierXE电喷雾串联四极杆质谱仪(美国Waters公司)，Masslynx4.1质谱工作站软件。乙腈、甲醇(HPLC级，Fisher科技公司);无水MgSO4(分析纯)，用前在500℃马弗炉内烘5h，200℃时取出装瓶，贮存于干燥器中，冷却备用;乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)、十八烷基硅烷(ODSC18，第37卷2009年11月分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告ChineseJournalofAnalyticalChemistry第11期1638～1644AgelaTechnologies公司);其它试剂均为分析纯;水为超纯水(Milli-QGradient自制);牛乳取自黑龙江省哈尔滨市香坊农场。磺胺胍、氨苯磺胺、磺胺二甲异嘧啶、磺胺醋酰、磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺(5)对甲氧嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲氧哒嗪、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺甲基异唑、磺胺乙氧哒嗪、磺胺异唑、磺胺苯酰、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺喹啉、磺胺苯吡唑和磺胺硝苯，共24种SAs标准品(德国Dr.Ehrenstorfer公司)。2.2标准溶液的制备先分别准确称取各种SAs的标准品10mg于烧杯中，加入少量乙腈，待完全溶解后转移到100mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，配制浓度为100mg/L的单标储备液，于－20℃条件下储...
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