·74。中国药理学通报ChinesePharmacologicalBulletin2012Jan；28(1)：74—8网络出版时间：2011—12—2613：04网络出版地址：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／34．1086．R．20111226．1304．030．html左旋多巴甲酯对剥夺性弱视猫视皮层17区神经细胞的影响黎荣，梁韬，林兴，张士军，蒋伟哲，黄仁彬(广西医科大学药学院，广西南宁530021)doi：10．3969／j．issn．1001—1978．2012．0l8．文献标识码：A文章编号：1001—1978(2012)01—0074—05中国图书分类号：R一332；R322．81；R329．25；R363—332；R_777．44：R988．1摘要：目的观察不同剂量的左旋多巴甲酯对剥夺性弱视猫模型视皮层17区神经细胞凋亡情况以及神经生长因子(NGF)和FOS蛋白表达的影咆，探讨左旋多巴甲酯对弱视的治疗效果及其作用机制。方法健康的幼猫30只随机分成6组：左旋多巴甲酯高(LDME)、中(LDME)、低(LD—ME。．)剂量组、阳性对照组(PC)、模型对照组(MC)及正常对照组(NC)，每组5只。除了正常组，于4周龄时参照Hubel经典实验方法对各组幼猫进行麻醉后的左眼单纯上下睑缝合建立剥夺性弱视，12周后打开缝合眼并开始给药，每天灌胃左旋多巴甲酯2O，40，80mg·kg～，阳性对照组为左旋多巴40mg·kg～，正常组与模型组为等剂量生理盐水，每天1次持续30d。进行Nissl染色观察，TUNEL检测法观察视皮层神经细胞的凋亡情况，经免疫组化技术检测视皮层17区神经细胞中NGF以及FOS蛋白的表达情况。结果左旋多巴甲酯有效地降低了弱视眼视皮层17区中的神经细胞凋亡率。模型对照组弱视眼视皮层17区NGF和FOS免疫阳性细胞数量明显低于正常对照组，差异有统计学意义(P<0．01)。给药治疗后各组视皮层17区NGF和FOS免疫阳性细胞密度较模型对照组均为增加，差异有统计学意义(P<收稿日期：2011—09—15，修回日期：2011—10—09基金项目：国家自然科学基金资助项目(No30760285)；广西研究生教育创新计划资助项目(No2008105981007D27)作者简介：黎荣(1985一)，男，硕士生，研究方向：抗弱视药和生化药理学，Email：liror0g7878@163．eom；黄仁彬(1955一)，男，博士，教授，博士生导师，研究方向：抗弱视药和生化药理学，通讯作者，Tel：0771—5339805，E—mail：huangrenbin518@163．corn0．01或P<0．05)。结论左旋多巴甲酯对视皮层17区中神经细胞有保护作用，通过上调内源性NGF和FOS蛋白的表达来修复剥夺性弱视造成的结构与功能缺陷，可能与它们共同协调作用下重塑中枢视觉通路有关。关键词：左旋多巴甲酯；剥夺性弱视；细胞凋亡；神经生长因子；FOS蛋白；猫；视皮层17区弱视对儿童视力影响很大，若不采取及时的治疗将会导致终身视力缺陷。国外研究表明神经生长因子在具有调节视觉发育可塑性的作用J。即刻早期基因c—f0s的表达产物FOS蛋白同样参与了视皮层相关区域神经元功能活动的调控，从而与视觉发育的可塑性密切相关_4J。目前国外临床上多采用左旋多巴治疗弱视，文献报道其已取得了一定效果。而新合成的化学物质左旋多巴甲酯(LDME)将应用于弱视治疗研究。本研究采用TUNEL检测法和免疫组织化学法检测观察左旋多巴甲酯(LDME)对剥夺性弱视猫视皮层17区中细胞凋亡情况以及NGF、FOS阳性神经元的形态变化和数量分布的影响，探讨左旋多巴甲酯对弱视神经细胞的影响及治疗效果，从而为弱视的预防和治疗奠定基础。1材料与方法1．1主要仪器包埋机：JapanSakurafinetechnicalCo．Ltd，4590Model；低温高速离心机：德国西门子公司Geldoc2000；病理组织切片机：GermanyLeitz，2235Model；病理图像分析仪：GermanyLeicaCo．Ltd，DMR+550Model。theincubationof10tzmol·L～morphinefor48hours，thecAMPlevelinPC一12ceilssignificantlyin—creased，indicatingthatthecellularmodelofmorphinetolerancewassuccessfullyestablished．②Lowdoseketaminecouldpreventmorphinetolerance．⑧Theex—pressionofDOR--1inmorphinetolerantPC--12cellswassignificantlylowerthanthecontrol，andNR2Bwassignificantlyhigherthanthecontro1．Lowdoseket—amine(0．5b~mol·L。。)hadnoeffectonDOR一1andNR2Bexpression，butcouldreversethemorphine—in...
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