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生化基础知识-比色法VIP专享VIP免费

生化基础知识-比色法_第1页
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生化基础知识-比色法_第3页
1比色法原理(分光光度法)2多么美丽五彩斑斓的春天啊3为什么上述溶液呈现不同的颜色?4自然光-赤橙黄绿青蓝紫5波长决定颜色6光谱-连续不同波长光的集合7物质对不同波长光的选择性吸收8由于物质对不同波长光的选择性吸收而引起,物质呈现的是被吸收颜色的互补色。单色光互补光复色光9现在知道她的秘密了吗?10脑筋急转弯1、红光照射红色溶液,看透过什么色?2、红光照射绿色溶液,看透过什么色?11透光度(透射比)Transmittance透光度定义:0IITtT取值为0.0%~100.0%全部吸收全部吸收T=0.0%T=0.0%全部透过T=100.0%T=100.0%吸光度定义:IIIIttTA00lglglg12T、A与颜色的关系---------------------透光率(T)吸光度(A)---------------------10.0000.750.1250.50.3010.250.6020.170.7700.11.0000.051.3010.012.0000.0013.000---------------------?13测量物质光吸收的装置-比色计14比色计或分光光度计15物质的光吸收曲线-定性分析16吸光度与光径的关系17吸光度与浓度的关系18朗伯-比尔定律:A=-lgT=KCL19透光度(transmittance,T,透射率)T=It/I0吸光度(absorbance,A)光密度(opticaldensity,D或OD)A=-lgT=lgI0/ItLamb-beer定律:A=KCLK为吸光系数,C为浓度,L为光径cm摩尔吸光系数ε:当C=1mol/L,L=1cm,A=ε20比色定量——与标准浓度物质溶液比较21目视比色法观察方向空白c1c2c3c422比色计或分光光度计23比色法成立的基础A.有色或有吸收B.单色光24比色法比色法郎伯-比尔定律郎伯-比尔定律物质的选择性光吸收物质的选择性光吸收光光美丽的大自然美丽的大自然

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