流式细胞术及其科研应用VIP专享VIP免费

流式细胞术及其科研应用流式细胞仪的原理BDBiosciencesImmuneFunction流式细胞术的基本概念流式细胞术（FlowCytometry,简称FCM）是一种可以快速、准确、客观，并且同时检测单个微粒（通常是细胞）的多项特性，并加以定量的技术，同时可以对特定群体加以分选研究对象为生物颗粒，如各种细胞、微生物及人工合成微球等研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征，并加以定量BDBiosciencesImmuneFunction流式细胞术的特点极短时间内可分析大量细胞，只要标本中的细胞数量足够，流式细胞仪（Flowcytometer）可以每秒钟数十、数百、数千个细胞的速率进行测量，测量的细胞总数可达数千、数万乃至数百万个。可同时分析单个细胞的多种特征，当同时用多种分子探针，如用不同荧光素标记的不同单克隆抗体进行多色荧光染色，通过流式细胞分析，即可获得单细胞的多种信息，使细胞亚群的识别、计数更为准确。定性或定量分析细胞：通过荧光染色对单细胞的某些成分如DNA含量、抗原或受体表达量、Ca2+浓度、酶活性以及细胞的功能等均可进行单细胞水平的定性与定量分析强大的分选功能，在分析的同时可以对特定群体加以分选BDBiosciencesImmuneFunction流式细胞仪的检测范围细胞结构细胞大小细胞粒度细胞表面面积核浆比例DNA含量与细胞周期RNA含量蛋白质含量细胞功能细胞表面/胞浆/核的特异性抗原细胞活性细胞内细胞因子酶活性激素结合位点细胞受体BDBiosciencesImmuneFunction当前流式细胞分析发展趋势从相对细胞计数到绝对细胞计数从相对定量到绝对定量分析从单色到多色荧光分析从细胞膜成分到细胞内成分分析从细胞分析到可溶性成分的流式细胞分析BDBiosciencesImmuneFunction散射光信号RightAngleLightDetectorCellComplexitySSCForwardLightDetectorCellSurfaceAreaFSCIncidentLightSource前向角散射光（FSC,ForwardScatter）细胞相对大小及其表面积侧向角散射光（SSC,SideScatter）细胞粒度及细胞内相对复杂性LaserFALSSensorBDBiosciencesImmuneFunction外周全血细胞散射光双参数点图（红细胞溶解后）BDBiosciencesImmuneFunction流式细胞仪的检测信号荧光信号•使用荧光标记的单克隆抗体染色，做多色分析•荧光信号的强弱，反映了细胞抗原的表达含量BDBiosciencesImmuneFunction荧光信号双色直接染色BDBiosciencesImmuneFunction数据分析直方图分析BDBiosciencesImmuneFunction数据分析点图分析BDBiosciencesImmuneFunction数据分析等高图和密度图分析BDBiosciencesImmuneFunction数据分析三维图分析流式细胞仪的应用BDBiosciencesImmuneFunction•临床研究:血液、肿瘤、药理、免疫….•生物学研究：遗传、生殖、微生物、细胞生物、毒理、分子生物、….•环境研究：海洋生态研究….•制药工业•食品工业•农业畜牧业流式细胞仪的应用领域BDBiosciencesImmuneFunction流式细胞仪的临床应用(免疫)淋巴细胞免疫分型淋巴细胞亚群分析CD4绝对计数HIV的诊断与研究淋巴细胞CD4/CD8分析CD4绝对计数T细胞活化细胞移植的交叉配型和免疫状态监测免疫功能和免疫调控的研究淋巴细胞和单核细胞的活化检测细胞因子的检测HLA-B27检测BDBiosciencesImmuneFunction流式细胞仪的临床应用(血液)白血病和淋巴瘤免疫分型残留白血病造血干细胞计数PNH诊断网织红细胞分析血小板分析血小板膜糖蛋白分子的表达血小板活化网织血小板分析BDBiosciencesImmuneFunction流式细胞仪的临床应用(肿瘤)细胞周期分析DNA非整倍体的出现可能是癌前病变发生早期癌变的一个重要标志在L&L病理形态学不能做出诊断前可提供确切诊断信息DNA非整倍体的交界瘤应按恶性对待形态学表现良性的肿瘤出现非整倍体提示恶变可能DNA指数可作为判断间叶组织肿瘤良恶性的辅助指标多药耐药基因的检测BDBiosciencesImmuneFunction流式细胞仪的科研应用树突细胞研究干细胞研究细胞凋亡细胞动力学功能研究环境微生物分析流式细胞术与分子生物学研究BDBiosciencesImmuneFunction淋巴细胞亚群分析•根据功能，淋巴细胞主要分为B...