SDS尿蛋白电泳王连升法国Sebia公司上海代表处第一页，共三十九页。肾病的现状第二页，共三十九页。肾单位的生理结构和各类生理蛋白肾小管的废弃物排放最后形成的尿液含有1/3的白蛋白和2/3球蛋白肾小管重新吸收白蛋白转铁蛋白免疫球蛋白小分子蛋白肾小球过滤白蛋白转铁蛋白免疫球蛋白小分子蛋白小分子蛋白第三页，共三十九页。尿里的蛋白第四页，共三十九页。尿蛋白含量增加的原因间歇性的生理因素：食高蛋白饮食后，精神冲动、剧烈运动、长时间受寒，站立过久,病理性的：●肾前性（溢出性）●肾性●肾后性●肾小球损伤●肾小管损伤●混合性●选择性●非选择性第五页，共三十九页。>67kDa<67kDa溢出性蛋白尿血浆中相对分子质量较小或阳性电荷蛋白异常增多经肾小球滤过，超过肾小管重吸收能力形成蛋白尿。肾小球滤过、肾小管重吸收均正常。第六页，共三十九页。7常见蛋白种类及疾病游离轻链见于多发性骨髓瘤ß2微球蛋白见于淋巴组织增生综合征溶菌酶见于局部急性粒细胞白血病血红蛋白溶血性疾病,血型不合输血α1酸性糖蛋白见于支气管肺癌肌红蛋白挤压伤,心肌梗死……肾前性(溢出)蛋白尿第七页，共三十九页。肾后性蛋白尿•来源于肾小管代谢产生的、组织破坏分解的、炎症或药物刺激泌尿系统分泌的蛋白质，进入尿液而形成的蛋白尿。第八页，共三十九页。肾性蛋白尿•肾小球性蛋白尿•肾小球滤过膜因炎症、免疫、代谢等因素损伤后滤过膜孔径增大、断裂和〔或〕静电屏障作用减弱。•根据滤过膜损伤程度及尿蛋白的组分，尿蛋白分为2类：•〔1〕选择性蛋白尿〔selectiveproteinuria〕：相对分子质量中等的清蛋白为主•〔2〕非选择性蛋白尿〔non-selectiveproteinuria〕：以相对分子质量较大和中等的蛋白质同时存在为主。反映肾小球毛细管壁有严重断裂和损伤。•肾小管性蛋白尿•肾小管在受到感染、中毒损伤或继发于肾小球疾病时，因重吸收能力降低或抑制，而出现的以相对分子质量较小的蛋白为主的蛋白尿。第九页，共三十九页。肾小球过滤•大分子量蛋白〔主要为＞67kDa〕无法透过肾小球进入肾小管•其他决定各种蛋白被过滤的因素:分析形状,带电量,血浆浓度.•还有一些血液动力学因素可影响蛋白的过滤.第十页，共三十九页。肾小球损伤•原因糖尿病感染性损伤(细菌感染,乙肝患者,水痘,梅毒,单核白血球增多症,…)其他系统性疾病(自动免疫系统,癌症,…)中毒现象(重金属,药物中毒,…)•此时,我们可以在尿蛋白中发现白蛋白和其他大分子量蛋白(大于67kDa)。第十一页，共三十九页。肾小管的再次吸收功能•在肾小球中被过滤掉的小分子蛋白，分子量小于67kDa,将会在肾小管内被重新吸收(内吞作用).99%的在肾小球内被过滤的蛋白,都将会被重新吸收利用.例如,18g/24-h白蛋白将会被过滤掉;30mg/24-h白蛋白在人的尿液中被发现.第十二页，共三十九页。肾小管损伤•肾小管损伤将会改变其对小蛋白分子的重新吸收能力(小于67kDa的蛋白)•产生原因遗传原因(Fanconisyndrome)代谢性疾病(糖尿病,草酸中毒)免疫球蛋白单克隆扩增(myeloma,Waldenström)药物作用(氨基甙类抗生素)中毒(金属中毒,氨基甙类)•白蛋白(<30%)及其它小分子蛋白(小于67kDa)都将会在尿液中被找到。>67kDa<67kDa<67kDa>67kDa第十三页，共三十九页。混合性损伤•混合性蛋白尿•肾脏病变同时或相继累及肾小球和肾小管时而产生的蛋白尿。•各组分所占比例因病变损害部位不同而不一致。>67kDa<67kDa第十四页，共三十九页。尿液的收集和保存•尿液收集:•-24小时尿•-晨尿中段•要注意是否为间歇性蛋白尿•保存•-新鲜尿液•-4°C保存最多一周•-注意防腐，防止反复冻融〔导致IgG浓度降低〕•-检测前离心(10min3000rpm〕第十五页，共三十九页。尿蛋白检测初级分析是否有蛋白增加-直接进行总尿蛋白浓度测定进一步分析:•蛋白尿类型•本周氏蛋白类型•特异蛋白定量第十六页，共三十九页。定量分析蛋白尿•筛查-溴酚蓝试纸条检测(>150-200mg/L):蛋白尿阳性变蓝，本周氏蛋白时会产生假阴性•定量检测方法-比浊法〔不建议使用〕•-建议采用比色法〔焦性没食子酚红，考马斯蓝〕第十七页，共三十九页。尿中总蛋白的定量分析无法检测到低浓度的本...
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