第1页共9页编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第1页共9页流式细胞术在哺乳动物精液质量检测中的应用采克俊1,2，司维1,2，李亚辉1,2,3，季维智1,4（1.中国科学院昆明动物研究所，云南昆明650223;2.中国科学院研究生院，北京100039；3.云南农业大学食品科学与技术学院，云南昆明650201）摘要：精液检测的首要目标就是快速准确地确定其生育力。同时具备多种特性功能完整的精子才能受精，因而只有同时客观地检测多个指标，才能更好地反映精子的生育力。精子检测的传统方法费时费力，检测精子数量少，指标单一，而且易受操作者的主观影响，不能准确地反映精子功能。流式细胞术(FCM)为精子功能研究提供了一种快速、客观、多指标、大通量的检测手段；利用FCM检测精子的质膜完整性、顶体状态、染色质结构、线粒体功能以及细胞凋亡等，可以得知精子的相关功能情况。随着新的荧光探针、染色方法的不断开发和改进，FCM为精液质量检测提供了一种新的检测平台，应用前景极其广阔。关键词：流式细胞术；精子；检测；荧光探针EvaluationofMammalianSemenQualitybyFlowCytometryCAIKe-jun1,2,SIWei1,2,LIYA-hui1,2,3,JIWei-zhi1,4(1.KunmingInstituteofZoology,theChineseAcademyofSciences,Kunming650223,China;2.GraduateSchool,theChineseAcademyofSciences,Beijing100039,China3.CollegeofFoodScienceandTechnology,YunnanAgriculturalUniversity,Kunming650201,China)Abstract:Theprimarygoalofallsemenanalysesistoaccuratelydeterminethefertilizingpotentialofasemensamplerapidly.Sinceaspermatozoonmustpossessmanyattributesinordertofertilizeanoocyte,theonlywaythatwecanmorepreciselypredictthefertilityistodevelopunbiasedassaysthatmeasureseveralspermtraitssimultaneously.Conventionallaboratoryassaysofspermatozoa,usingsubjectivemethod,manyaretimeconsuming,andarenecessarilyconductedonsamplesofrelativelysmallsize,fallshortofpredictingthespermfunction.Flowcytometry(FCM)permitsustoobjectivelymeasurethousandsofspermformultiplecharacteristicsinashorttimewithminimumpreparation.TheapplicationsofFCMtoevaluationofsemenqualityincludingspermmembraneintegrity,acrosomestatus,chromatinstructure,mitochondrialfunctionaswellasapoptosisetc,provideusvaluableinformationregardingspermfunction.Newfluorescentprobesandtechniquesarecontinuouslybeingdeveloped.FCMofferspowerfultoolsandexcitingopportunitiesforimprovingourabilitytoaccuratelyevaluatesemenquality.基金项目：国家自然科学基金（39970117）；中国科学院重大项目（KZ952-J1-109）44通讯作者（Correspondingauthor）,Tel:0871-5139413,E-mail:wji@mail.kiz,ac.cn第2页共9页第1页共9页编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第2页共9页Keywords:Flowcytometry;Spermatozoa;Evaluation;Fluorescentprobes精液质量检测在临床治疗不孕症及家畜良种繁殖和育种中具有重要作用。常规的精液检查（精子密度、活力、形态等）重复性差，提供的精子功能的信息非常有限，不能为生育力提供准确评估的依据。其他方法（包括精子染色的显微镜检测、精子-颈粘液相互作用检查、精子穿透去透明带仓鼠卵实验、低渗肿胀实验以及超微结构检查等）虽然可以提供精子功能方面的一些信息，但费时费力；检测精子数量少；指标单一；且易受操作者的主观影响，不能准确反映精子的功能。近年来，随着生殖生物学的发展和人类对辅助生殖技术的迫切需求，基于精子形态学观察为主的传统检测方法已不能满足人们的需要，因而寻找一种快速、准确的精液质量检测方法显得十分迫切。流式细胞术(flowcytometry,FCM)是20世纪70年代发展起来的一种单细胞快速分析技术，已广泛应用于细胞生物学和医学的各个领域。流式细胞术的基本原理是：特异荧光探针标记的单细胞悬液在管道中稳定地流动，细胞一个个依次经过喷嘴，经恒定功率的激光束激发后产生散射光和激发荧光。这两种...
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