第1页共6页SHR大鼠测血压、心率取血，冷冻保存配对分组实验组大鼠：CoQ10对照组大鼠：生理盐水15天后肌肉注射拉贝洛尔，测血压、心率处死动物，取血，测指标，心脏称重数据分析、讨论结果编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第1页共6页开题报告：辅酶Q10抗脂质过氧化作用对SHR大鼠高血压的防治研究02级法文班徐呈兰晓曦庞文璟解轶声林盟菲孟晋方原吴贻明指导老师：李稻实验目的：探究、比较单用辅酶Q10以及辅酶Q10与拉贝洛尔协同作用对SHR大鼠的血压升高的抑制或降压的作用，并对辅酶Q10的降压作用机制进行初步探讨。实验意义：高血压是一种常见、多发病，原发性高血压的病因不详，但与遗传因素和环境因素密切相关，所以对高血压高危人群的防治工作尤为重要。新近发现脂质过氧化反应可能参与了高血压发生和发展的病理过程[9]。但也有报道认为，辅酶Q10具有较好的抗脂质过氧化的作用[8]。本实验利用血压未达平台期的SHR大鼠模拟高血压高危人群，并初步研究辅酶Q10以及辅酶Q10与拉贝洛尔协同作用对高血压防治的效果，探索临床用药的新途径。技术路线：第2页共6页第1页共6页编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第2页共6页实验动物：ＳＨＲ大鼠（雄性，10周龄，１２只，随机分为：对照组和实验组）动物来源：中国科学院动物实验中心实验器材：1B型RBP大鼠血压计、i-STAT型血气电解质分析仪、725型分光光度计、80-2台式离心机、旋涡混匀器、水浴箱、研磨器、分析天平（0.1mg）、可调式Eppendorf移液器、鼠台、量筒、试管、注射器、常用手术器材、保鲜薄膜等。检测试剂盒：丙二醛（MDA）测定试剂盒（南京建成生物工程研究所）超氧化物歧化酶（SOD）测试盒（南京建成生物工程研究所）一氧化氮（NO）测试盒（南京建成生物工程研究所）实验药品：生理盐水：作为安慰剂，上海第二医科大学病生教研室提供辅酶Q10胶囊：上海信谊制药公司拉贝洛尔：江苏天禾制药公司无水乙醇、冰醋酸第3页共6页第2页共6页ControlGroupStudyGroupBP服用药物15天后，实验组对照组大鼠平均血压、心率比较（n=6)HRControlGroupStudyGroup编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第3页共6页用量：辅酶Q10：20mg/day服用15天。拉贝洛尔：小剂量具体用量在预实验后确定。实验方法与操作步骤：1．12只大鼠稳定两天，每天测一次血压（1B型RBP大鼠血压计），使大鼠习惯。根据大鼠血压配对后随机分成两组。（随机数法）２．两天后，眼球取血1.5ｍl于试管。静置后离心（3000rpm×10min）取上层血清，再一次离心（5000rpm×5min）取上清液，-20C冷冻待用。３．实验组大鼠灌胃辅酶Q10（20mg/day）15天，对照组大鼠灌胃安慰剂（生理盐水）15天。灌胃溶液自行于灌胃当天调配，灌胃液为20mg/3ml生理盐水。４．每隔5天测量并记录血压、心率。５．第15天，测完血压、心率后，肌肉注射拉贝洛尔（剂量待定），于30min后测量并记录血压和心率。６．乙醚麻醉动物，处死动物，称重。用大剪刀开胸，即刻用注射器从心脏抽血，将针头对准电极板注血口，注入全血到标准刻度，盖上小盖，插入i-STAT血液分析仪器，分析并记录血液中钾离子。最后再取血1.5ml于试管中，血液静置后离心取上层血清，将15天前冰冻的血清取出，化冻，两份血清一起做丙二醛、SOD、NO检测（方法详见试剂盒说明书）并记录结果。７．取出心脏，清理、称重，计算：心重（g）/体重（g）。８．运用配对T检验的方法，对数据进行统计学分析。预期结果：1．服药15天后，对照组和实验组大鼠平均血压有明显差异，说明辅酶Q10对SHR大鼠有降压作用，推迟其血压达平台期的时间（统计学上有意义）。2．拉贝洛尔+辅酶Q用药时，可降低拉贝洛尔的剂量，达到降压效果，或延长药效维持时间。第4页共6页第3页共6页StudyGroupΔBP15天后，肌注拉贝洛尔后，实验组对照组大鼠平均血压变化(n=6)0ControlGroup编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第4页共6页3．血清中MDA浓度：服用辅酶Q10后明显下降；SOD浓度：服用辅酶Q10后不变；NO浓度：服用辅酶Q10后明显升高。证明辅酶Q10的降压机制为...
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