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水溶性多糖的提取及结构测定实施方案VIP免费

水溶性多糖的提取及结构测定实施方案_第1页
水溶性多糖的提取及结构测定实施方案_第2页
水溶性多糖的提取及结构测定方案1多糖的生产及提取种子液制备。单菌落入50ml(葡萄糖2%,蛋白胨1%,乙酸0.4%,磷酸二氢钾0.15%、硫酸镁0.03%,乙醇1.5%,naoh0.25%,115-120℃维持20min。)120r/m48h。将种子液按5%(v/v)转接入100ml上述种子液中,120r/m,4d。4000r/m去bc,0.22μm膜过滤去细胞或14000r/m,20min去细胞。50℃旋转蒸发浓缩至原体积的1/5。加入无水乙醇,使其浓度为85%。沉淀再经90%乙醇洗涤3次。50℃真空干燥24h。[1]杜秀菊,徐伟,穆红梅,彭向前,冯玮.桦褐孔菌多糖的药理活性与化学结构研究进展[j].食用菌学报,2012,01:100-104.[1]林华娟,田晓春,秦小明,路垚,杨基柱.金花茶多糖单一成分的化学结构特征解析[j].食品科学,2013,03:141-146.2多糖除杂(sevag法)多糖加入适量蒸馏水溶解,按多糖溶液:氯仿:正丁醇=25:5:1比例加入氯仿及正丁醇,漩涡振荡20-30min,静置分层(或者3400r/m,15min),提取水层多糖液,反复操作3次,获得多糖水溶液,将其稀释至10倍,在紫外-可见分光光度计扫描,直至260-280nm处没有吸收峰为止。(张倩,张民,王超,等.枸杞多糖的分离纯化及结构研究[j].食品与发酵工业,2014,40(12):41-47.)[1]李娟.桦褐孔菌子实体和发酵多糖的促生细胞因子作用及化学结构研究[d].浙江理工大学,2013.3分子量测定经除杂的多糖水溶液加入无水乙醇,使其浓度为90%,经50℃真空干燥24h,保存备用。称取一定量的多糖,加入蒸馏水溶解,以葡聚糖为标准物质,上gpc进行分子量测定。([1]罗建光.鲍氏层孔菌菌丝体多糖分离纯化、结构鉴定及其生物活性的研究[d].南京农业大学,2010.)第1页共2页4多糖组成测定(1)称取适量多糖于具塞试管中,加入2mol/l三氟乙酸(tfa)4ml,在120℃下水解2h。(2)减压蒸干(低于40℃)。(3)然后加入3ml甲醇蒸干,重复以上操作4一5次,以完全除去tfa。[1]姜军.山药多糖的分离纯化及其化学结构的初步研究[d].扬州大学,2007.[1]毛丰玮.亚麻籽壳多糖的提取、分离纯化与结构研究[d].浙江工商大学,2013.[1]凡军民.毛头鬼伞菌丝体多糖的分离、纯化和化学结构鉴定及生物活性研究[d].南京农业大学,2006.(4)hplc测定色谱条件为:色谱柱为shodexks804sugar(300mm×7.8mm)柱温40度流动相为水-1流速0.8ml·min检测用410rⅠ示差检测器,数据处理用810gpc软件进行。同时用鼠李糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸8种单糖进行对照,根据峰值确定样品的单糖组成。([1]李军.阿魏侧耳子实体多糖分离纯化及其化学结构的初步研究[d].华中农业大学,2004.)5红外光谱确定多糖结构水溶性多糖的提取及结构测定方案.doc免费为全国范文类知名网站,下载全文稍作修改便可使用,即刻完成写稿任务。支付6元已有11人下载下载这篇word文档第2页共2页

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