。模块检测卷（四）1.（12分）研究人员利用小鼠（2N＝40）的单倍体ES细胞（只含一个染色体组），成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图所示：注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶，箭头指向的位置为限制酶的切割位置；Ampr是氨苄青霉素抗性基因，Neor是G418抗性基因。（1）重组质粒上的抗生素抗性基因可作为_________________________，其作用是有利于筛选出含有目的基因的细胞。氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neor的小鼠细胞，结合上图推测，过程①选用的两种限制酶是（选填图中的编号），图中③处的培养液应添加（填“氨苄青霉素”或“G418”）。（2）若图中过程①选用的两种限制酶识别序列和切割位置分别是，则经这两种限制酶切割后所产生的黏性末端是，此时，图中过程②应选用（填“E·coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”）。（3）据图分析，细胞乙内除线粒体DNA外，还有个DNA分子；细胞乙发育成桑椹胚的过程中细胞分裂方式是，将细胞乙培养成桑椹胚的技术称为技术。2.（12分）下图是转基因猕猴培养过程示意图，请据图回答：（1）获取绿色荧光蛋白基因的方法包括、利用PCR技术扩增和用化学方法直接人工合成等。基因工程的核心步骤是（用图中数字表示），②过程常用的方法是_______________________________________。（2）利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知的目的基因核苷酸序列，根据这一序列设计并合成___________________________________________。（3）图中过程⑦称为，所用的早期胚胎通常是发育至期的胚胎，受体雌猴对移入子宫的外来胚胎不会发生反应，这为胚胎在受体雌猴体内的存活提供了可能。3.（12分）甘蓝自花传粉后，花粉在雌蕊柱头上的萌发受阻会导致自交不亲和，这与甘蓝柱头细胞中MLPK基因的表达有关。科研人员将反义MLPK基因表达载体导入甘蓝细胞，转录出的反义mRNA与甘蓝细胞中的MLPK基因转录出的mRNA互补，阻止mRNA的翻译，可增加甘蓝自交结籽数量。相关操作过程如图所示，回答下列问题：（1）图中①表示；PCR过程需要酶。（2）在构建基因表达载体时，应将反义MLPK基因与细胞中特异表达的启动子等调控组件重组在一起。（3）科研人员依据重组载体的结构特点，用添加的培养基筛选出导入载体的甘蓝细胞。组织培养时，诱导细胞脱分化形成，通过提高培养基中（填“生长素”或“细胞分裂素”）的含量诱导再分化和芽原基的形成，最终获得甘蓝植株。（4）要在个体生物学水平上鉴定反义MLPK基因是否发挥作用，方法是__________________________________。4.（12分）运用动物体细胞杂交技术可实现基因定位。研究发现：用人体细胞与小鼠体细胞进行杂交得到的杂种细胞含有双方的染色体。杂种细胞在持续分裂过程中仅保留小鼠的染色体而人的染色体逐渐丢失，最后只剩一条或几条染色体。如图是人的缺乏HGPRT酶的突变细胞株（HGPRT－）和小鼠的缺乏TK酶的细胞株（TK－）融合后在HAT培养液中培养的过程，结果表明，最终人的染色体在融合细胞中仅存有3号染色体或17号染色体或两者都有。已知只有同时具有HGPRT酶和TK酶的融合细胞才可在HAT培养液中长期存活与繁殖。请回答下列相关问题：（1）体细胞杂交克服了的障碍，过程①常用的生物方法是。（2）过程②中，为了防止细菌的污染，所用培养液应该添加一定量的，此外，还要定期用处理细胞，使贴壁生长的细胞脱落，形成细胞悬液。（3）从培养过程看，HAT培养液不仅能提供养料，还起作用。（4）从图示结果看，可以确定人的基因位于号染色体上。5.（12分）利用细胞工程技术制备抗人绒毛膜促性腺激素（HCG）单克隆抗体，其主要流程如下：→→→回答下列问题：（1）制备抗HCG单克隆抗体过程中，用到的动物细胞工程技术有和。（2）细胞DNA合成有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。在HAT培养基中加入了氨基嘌呤，杂交瘤细胞能连续增殖，未融合细胞以及同种融合细胞因不能增殖而死亡。由此可判断骨髓瘤细胞DNA合成存在（填“D”“S”或“D和S”）途径。（3）步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养及抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行。先将细胞悬液稀释到7～10...
