I 基于 His@AuCNs 模拟酶活性对碱性磷酸酶和 NO 检测的研究摘要碱性磷酸酶(ALP)作为生物化学的代表介质,积极参与生物体生命活动的每一个过程当中,从代谢、信号转导、分子运输到基因信息的表达。从结构上讲 ,ALP 由两个类似的单体组成,其中含有五个半胱氨酸残基、两个锌原子和一个镁原子,它们赋予了它催化功能。ALP 主要作为生物体内去磷酸化的催化剂,在碱性环境中具有最佳的活性。ALP 在原核生物和真核生物中都可能广泛分布。到目前为止,ALP 在现代生命科学中的重要作用毋庸置疑。在研究中,基于其去除磷酸盐的功能,ALP 常被作为核酸版本相关实验的工具酶,更重要的是,在医学研究中,ALP 是一种公认的一系列疾病的生物标志物。研究表明,血清中 ALP 浓度升高往往与胆道梗阻、骨病,如成骨细胞骨肿瘤和骨软化、类白细胞反应或淋巴瘤有关。同时,当一些代谢紊乱,如血液病、再生障碍性贫血发生时,ALP 浓度也可能降低。值得注意的是,与异常 ALP 活性相关的疾病谱仍呈现出增长趋势。综上所述,由于 ALP 的应用如此广泛,必须建立一种精确和敏感的检测方法,以确保 ALP 相关实践的质量。近年来,纳米材料基酶模拟物由于其与传统天然酶相比具有较高的稳定性、较低的成本和易于制备的特点而得到了广泛的研究。纳米酶,特别是过氧化物酶模拟物在广泛的应用中显示出巨大的潜力。本研究中,我们使用聚 N-乙烯基-2-吡咯烷酮(PVP)作为稳定剂,并使用 PDDA 作为功能性大分子,以产生即具有稳定结构单元分散体又具有阳离子聚电解质功能化的石墨烯纳米片(GNs)。我们对 His@AuNCs 用 GNs 进行 Hybrid 组装,发现加入 TMB 和 H2O2的溶液颜色由无色变为蓝色,并在 652nm 处出现明显的紫外吸收峰,证明了组装后 His@AuNCs 具有优异的模拟过氧化物酶活性。为了提高其模拟过氧化物酶活性,用不同浓度的 GNs 进行组装,结果显示随着 GNs浓度的增大,组装后的 His@AuNCs 的催化活性也在增大,于是我们采用最大浓度的 GNs 组装的 His@AuNCs 进行酶催化实验,并遵循典型的 Michaelis-Menten动力学。His@AuNCs/GN 与单独的 His@AuNCs 相比表现出最低的 Km 值(0.032mM)和最高的 Vmax 值(3.82×10-8M*s-1)。实验结果表明与未组装的His@AuNCs 相比,组装后的 His@AuNCs 对 TMB 具有比其他材料更好的亲和力然后,我们通过对 HisAuNCs/GN 过氧化物酶样活性的调控,合理地建立了一个IIPPi 和 AL...