摘要研究背景我国白血病近十年发病以 2%的速度递增，是一种起源于造血前体细胞的恶性肿瘤，目前主要的治疗方法为造血干细胞移植和化疗。化疗是目前治疗白血病的主要手段，然而化疗的副作用及多药耐药的产生，给临床治疗白血病预期的完全缓解和巩固治疗带来了诸多困难。中药作为我国传统治疗白血病的手段，具有个体化、辩证施治的明显优势，实践证明中医中药在治疗白血病中显示出重要作用。近年来随着中药及其有效成分抗白血病的临床及实验研究日益广泛，部分研究发现温阳中药中的有效成分可以改变白血病细胞的生物学活性，诱导白血病细胞成熟分化和凋亡。半夏是传统中草药材，内含多种有效活性成分，半夏提取物和生物总碱抑制白血病细胞增殖有相关的研究，但其具体作用机制缺乏研究。目的探索半夏提取物有效成份对阿霉素耐药的慢性髓系细胞白血病细胞 K562 增殖的抑制作用和诱导细胞凋亡的作用，探寻其作用的分子水平机制；探讨半夏提取物在耐药的白血病治疗中可能的应用价值。研究方法用氯仿低温超声方法提取半夏有效成分，分别干预经阿霉素处理的 K562-ADR 细胞株设置 0.1 mg/ml、0.3 mg/ml、0.5 mg/ml、0.7 mg/ml、1 mg/ml、2 mg/ml、3 mg/ml 7 种浓度，尔后通过 IC50 计算得半数抑制浓度，再优化浓度范围。观察半夏提取物干预慢性髓系白血病耐药细胞 K562-ADR 形态学改变；CCK-8 法检测半夏提取物对 K562-ADR 细胞增殖的抑制作用；实时荧光定量 PCR 检测半夏提取物对 K562-ADR 细胞检测 Bax、Bcl-2、MDM2、BCR-ABL、PML 基因表达量。研究结果1．CCK-8 法检测结果显示：半夏提取物处理对 K562、k562-ADR 白血病细胞的增殖均有较强的抑制作用。2．由 Graphpad Prism 分别计算得半夏提取物对 K562 组 IC50 为 1.83mg/ml，K562-ADR组 IC50 为 2.36mg/ml。3．实时荧光定量 PCR 显示：① 1、3、5mg/ml 半夏提取物可能不调控 Bax/Bcl-2 途径使K562-ADR 细胞凋亡，5mg/ml 在 48h、72h 干预时 Bcl-2 有最大值（P<0.01）Bax 表达量下调，提示该浓度下 Bax/Bcl-2 途径可能不参与 K562-ADR 细胞凋亡；② 1、3、5mg/ml 半夏提取物干预48h 后影响 K562、K562-ADR 细胞 MDM2、BCR-ABL、PML 转录表达水平，结果显示 1、3mg/ml半夏提取物可能激活 K562-ADR 细胞 MDM2、BCR-ABL、PML 表达。③ 0.5、0.7mg/ml 半夏提取物干预 48、72 h 后影响 K562-ADR 细胞转录 Bax、Bcl-2 表达...
