维生素 C 含量测定的实验设计方案一、目的与要求(1)掌握维生素 C 的含量测定的原理和操作.(2)掌握维生素 C 的分子式和结构简式,了解维生素 C 的还原性。(3）掌握紫外分光光度法维生素 C 含量的测定的方法。(4)熟悉精密紫外可见分光光度计的使用方法.（5)掌握用标准曲线法进行定量分析的原理和方法。二、方法提要 维生素 C（Vitamin C ,Ascorbic Acid）广泛存在于新奇水果中,它具有保持肌肤润滑、防止衰老、抗坏血酸等作用，是人体必需的主要维生素之一，是人体正常生理代谢不可缺少的一类有机物［1]。维生素 C 在水果中主要以还原型（ASA）存在。维生素Ｃ又名抗坏血酸是一种含有 6 个碳原子的酸性多羟基化合物,分子式为 C6H8O6,分子量为 176.1。能溶于水、乙醇和甲醇，而不溶于其他有机溶剂,具有酸性和还原性，有 4 种异构体，即 L-抗坏血酸、D—抗坏血酸、L-异抗坏血酸、D-异抗坏血酸。天然抗坏血酸主要以 L—抗坏血酸为主，其效力最高.抗坏血酸在合适的条件下，可氧化成脱氢抗坏血酸，脱氢后的 L-脱氢抗坏血酸在生物体内可还原为 L—抗坏血酸，且这种变化是可逆的，故仍有生物活性.脱氢抗坏血酸可进一步被氧化,生成二酮古洛糖酸,而这一过程是不可逆的.在许多水果和蔬菜中，维生素 C主要以还原型抗坏血酸存在。维生素 C 的固体较稳定，水溶性最容易受氧化，所以测定 VC的准确性很大程度上取决于分析技术。 水果中 VC 含量的测定一般采纳 2，6—-二氯靛酚滴定法[2］、碘量法［3]、2，4—二硝基苯肼法[4]、荧光分光光度法[5］高效液相色谱法[6]和点位滴定法［7]等,这些方法都有所用试剂不稳、操作程序复杂、费时等缺点，为此，此实验采纳分光光度法［8]，首先测定维生素 C 的标准曲线,以吸光度差值△A 对抗坏血酸浓度 C 绘制标准曲线，以此为基础测定样品的△A，并求得水果中维生素 C 的含量.本方法与常规方法比较，具有准确、快速、稳定、试剂易得等优点。维生素 C 是烯醇化合物,具有—C=C—基,在可见光区无吸收,在紫外区有吸收。按实验方法,分别对不同浓度的标准维生素 C 与试剂空白溶液在 200～400nm 波长范围内进行扫描,通过吸收光谱曲线确定维生素 C 水溶液的最大吸收波长.又根据维生素 C 对碱不稳定的特性，于最大吸收波长处测定样品溶液与碱处理样品两者吸收光度之差，通过查标准维生素 C 的标准曲线，即可计算样品维生素 C 的含量。这种方法具有准确、快速、重现性好等优点，还适...
