1.2 基因工程的基本操作程序 [教学目标]1、简述基因工程原理及基本操作程序。2、尝试设计某一转基因生物的研制过程.[教学重点和难点]1、教学重点基因工程基本操作程序的四个步骤。2、教学难点(1)从基因文库中猎取目的基因。(2)利用 PCR 技术扩增目的基因。[教学过程]一、目的基因的猎取:1.目的基因:符合人们需要的,编码蛋白质的.2.猎取目的基因的方法 (1)从基因文库中猎取目的基因① 基因文库:将含有某种生物不同基因的许多,导人受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。基因组文库:含有一种生物的基因② 种类cDNA 文库:含有一种生物的基因③ 目的基因的猎取根据基因的有关信息:基因的序列、基因在上的位置、基因的产物 mRNA、基因的产物蛋白质等特性猎取目的基因。(2)利用 PCR 技术扩增目的基因。①PCR:是一项在生物体外特定 DNA 片段的核酸合成技术。② 条件:已知目的基因的序列。③ 过程:目的基因 DNA 受热形成,与结合,然后在 ______ 的 作 用 下 进 行 延 伸 形 成DNA。④ 方式:指数扩增=2n(n 为扩增循环的次数)(3)人工合成法:基因较小,核苷酸序列已知,可以人工合成。例 1 下列猎取目的基因的方法中需要模板链的是( ) ① 从基因文库中猎取目的基因 ②利用 PCR 技术扩增目的基因 ③反转录法 ④通过DNA 合成仪利用化学方法人工合成A.①②③④ B.①②③ C.②③④ D.②③二、基因表达载体的构建1.表达载体的组成:目的基因+++标记基因等.2.启动子:位于基因的,它是结合的部位,驱动基因转录产生 mRNA。3.终止子:位于基因的,终止。4.表达载体的功能:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且给下一代;使目的基因 ____ 和发挥作用。5.标记基因:受体细胞是否含有目的基因。6.不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同,基因表达载体的构建上也会有所差别。例 2 科学家在培育抗虫棉时,经过了许多复杂的过程和不懈的努力,才获得成功。起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中,然后导入棉花的受精卵中,结果抗虫基因在棉花体内没有表达.然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端),导人棉花受精卵,长成的棉花植株还是没有抗虫能力.科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端),导入棉花受精卵,结果成长的植株,有了抗虫能力.由以上过程推知,作为目的基因的运载体应具备的结...