选修 3一、 基因工程1、（a）基因工程的诞生（一）基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 DNA 重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，发明出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 DNA 分子水平上进行设计和施工的，又叫做 DNA 重组技术。2、（a）基因工程的原理及技术原理：基因重组技术：（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：重要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：可以识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）成果：经限制酶切割产生的 DNA 片段末端一般有两种形式：黏性末端和平末端。2.“分子缝合针”——DNA 连接酶 (1)两种 DNA 连接酶（E·coliDNA 连接酶和 T4DNA 连接酶）的比较：① 相似点：都缝合磷酸二酯键。② 区别：E·coliDNA 连接酶来源于 T4 噬菌体，只能将双链 DNA 片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而 T4DNA 连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。(2)与 DNA 聚合酶作用的异同:DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已经有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA 连接酶是连接两个 DNA 片段 的末端，形成磷酸二酯键。3.“分子运送车”——载体（1）载体具有的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保留 。 ②具有一至多种限制酶切点，供外源 DNA 片 段插入 。 ③具有标识基因，供重组 DNA 的鉴定和选择 。 （2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、构造简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状 DNA 分子。（3）其他载体： 噬菌体的衍生物、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步： 目的基因的获取 1.目的基因是指： 编码蛋白质的构造基因 。2.原核基因采用直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用措施有反转录法 _ 和化学合成法 _ 。3.PCR 技术扩增目的基因（1）原理：DNA 双链复制 （2）过程：第一步：加热至 90～95℃DNA 解链 ； 第二步：冷却到 55～60℃，引物结合到互补 DNA 链 ； 第三步：加热至 70～75℃，热稳定 DNA 聚合酶从引物起始互补链的合成 。 第二步： 基因体现载体的构建 1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因可以体现和...
