—论文爱表专家—E 国学朮反丢网www.qikanwang.net代谢组学血浆样品前处理及其快速高分辨液相色谱质谱分析方法研究摘要米用快速咼分辨液相色谱质谱联用技术，对代谢组学研究中血浆样品的前处理方法进行了考察及优化，建立了用于血浆中小分子代谢物分析的前处理方法。通过考察有机溶剂沉淀蛋白（不同溶剂系统）和固相萃取（）两种方法对血浆中蛋白质去除程度及个代表性化合物的提取效果，确定米用乙腈沉淀蛋白法；进一步对乙腈沉淀蛋白法进行了细致的优化，确定使用倍体积的冷藏乙腈慢速沉淀可以达到最佳的处理效果。对血浆中种代表性化合物进行了方法学考察，结果表明，本方法重现性、精密度及样品冻融稳定性均良好。对穿插在检测序列中的生物质控样本检测结果进行主成分分析（），证明本方法在代谢组学研究中的可重复性及获得的数据的可靠性良好，适用于代谢组学研究。关键词代谢组学；血浆前处理方法；快速高分辨液相色谱质谱联用技术引言代谢组学是研究生物体内源性代谢物的整体及其变化规律的科学~,作为系统生物学的重要组成部分得到了迅速发展，并在制药、药物毒理等领域得到了成功应用—论文发表专家一m 国寻朮友叢网www.qikanwang.net体血浆作为代谢组学研究中的重要体液样本，其中含有多种内源性小分子代谢物，与常见的尿液样本相比，前处理过程相对复杂。首先，由于含有大量的蛋白质类成分，因此进行分析前需要去除蛋白质；其次，由于血浆中所含成分种类繁多、极性跨度很大，既有高极性的氨基酸、葡萄糖、核苷类等，也有低极性的脂类、固醇类等代谢物。代谢物成分的复杂性增加了血浆样品分析的难度与挑战。本研究采用快速高分辨液相色谱质谱联用技术（）技术，针对血浆样品前处理中常用的有机溶剂沉淀蛋白法与固相萃取方法进行了比较，并进行了方法优化及方法学考察；采用主成分分析（）对穿插在检测序列中的质量控制（）样品数据进行统计分析，最终建立了适合于代谢组学研究的血浆样品前处理方法。实验部分仪器与试剂（德国公司）；四极杆线性离子阱串联质谱仪（美国公司），配有源和数据处理系统；乙腈、甲醇、乙醇、丙酮和甲酸（色谱纯公司）；标准品分别购自公司、公司及中国药品生物制品检定所；实验用水为超纯水。人血浆样品（抗凝），米自中国医学科学院北京协和医院,采集后立即于一C 冷冻保存。色谱条件色谱柱（XX钮美国公司）；流动相：为（含）为。线性梯度洗脱：〜〜；〜，。每次进样前，色谱柱在初始流动相条件下平衡，流...
