第十六章细胞因子与黏附分子检测医学技术学院免疫教研室齐齐哈尔医学院免疫复习1.T细胞增殖试验的原理、刺激物？2.T细胞增殖试验的主要方法？3.T细胞介导的细胞毒试验主要方法？掌握：细胞因子、粘附分子概念；临床常用的测定方法熟悉：细胞因子的特性与功能；了解：其他齐齐哈尔医学院免疫第一节概述第二节临床常用的测定方法第三节细胞因子与黏附分子测定的临床应用齐齐哈尔医学院免疫第一节概述细胞因子(cytokine)是由免疫细胞及组织细胞表达并分泌，通过结合细胞表面的相应受体，在细胞间发挥相互调控作用的一类小分子蛋白质或多肽。齐齐哈尔医学院免疫掌握1.细胞因子的种类白细胞介素（IL）干扰素（IFN）集落刺激因子（CSF）肿瘤坏死因子（TNF）生长因子（GF）趋化因子一、细胞因子及其受体的特性与功能齐齐哈尔医学院免疫熟悉自分泌内分泌血液循环远距离作用旁分泌作用于比邻细胞细胞因子发挥作用的三种方式作用于分泌细胞自身2.细胞因子的共同特性与生物学功能齐齐哈尔医学院免疫熟悉高效性、多效性、重叠性、网络性、协同性、拮抗性迅速高效性非特异性2.细胞因子的共同特性齐齐哈尔医学院免疫熟悉肥大细胞胸腺细胞BIL-4活化、增殖、分化增殖增殖多效性齐齐哈尔医学院免疫IL-2、IL-4、IL-5IL-4+IL-5IL-4IFN-拮抗性重叠性协同性均有刺激B细胞增殖的功能更有效地诱导IgE类别转换IL-4阻断IFN-诱导类别转化的作用BBB齐齐哈尔医学院免疫2.细胞因子的生物学功能参与调控免疫细胞的发育、分化和功能参与调控免疫应答抗感染抗肿瘤诱导细胞凋亡齐齐哈尔医学院免疫了解3、细胞因子受体的共同特性细胞因子发挥作用：细胞因子与靶细胞表面特异性受体结合细胞因子受体结构：胞膜外区、跨膜区和胞质区组成细胞因子家族：Ⅰ型细胞因子受体家族、Ⅱ型细胞因子受体家族、肿瘤坏死因子受体超家族、免疫球蛋白受体超家族、趋化因子受体家族。齐齐哈尔医学院免疫了解齐齐哈尔医学院免疫二、黏附分子的特性与功能黏附分子（AM）是介导细胞间或细胞与细胞外基质间相互结合的分子。齐齐哈尔医学院免疫掌握1.黏附分子的特性黏附分子均为跨膜糖蛋白，由胞膜外区、跨膜区和胞质区三部分组成，根据其结构特点可分为免疫球蛋白超家族、整合素家族、选择素家族和钙黏蛋白家族。齐齐哈尔医学院免疫了解2.黏附分子的主要生物学功能参与细胞的信号转导与活化、细胞分化及发育参与免疫应答和炎症反应、淋巴细胞归巢、伤口愈合与血栓形成、调节细胞凋亡等功能齐齐哈尔医学院免疫了解B细胞与Th细胞间信号转导的细胞粘附分子齐齐哈尔医学院免疫第二节临床常用的测定方法一、酶联免疫吸附试验方法二、化学发光酶免疫试验三、流式细胞分析法四、酶联免疫斑点试验五、免疫学测定方法学评价齐齐哈尔医学院免疫基因水平：PCR技术。检测水平生物活性测定蛋白水平免疫学测定第二节临床常用的测定方法掌握齐齐哈尔医学院免疫生物活性测定：测活性。灵敏性高,特异性低蛋白水平ELISA免疫学测定化学发光酶免疫试验（含量）流式细胞术酶联免疫斑点试验第二节临床常用的测定方法掌握齐齐哈尔医学院免疫一、酶联免疫吸附试验（一）基本方法1.直接法---双抗体夹心法（测CK最常用方法）2.间接法3.抗原竞争法齐齐哈尔医学院免疫熟悉敏感性偏低不能区分细胞因子的生物学活性（二）方法学评价特异、简便成本低、易于推广和标准化等优点可同时检测大量标本且试验废弃物便于处理细胞因子测定的首选方法缺点优点齐齐哈尔医学院免疫了解二、化学发光酶免疫试验是以发光剂作为酶免疫测定的底物，通过发光反应增强测定的灵敏度。（一）基本方法双抗体夹心法（二）方法学评价特异性好、灵敏度高、线性范围宽、试剂稳定、可自动化检测齐齐哈尔医学院免疫了解三、流式细胞术（flowcytometry,FCM)分离和培养待检细胞细胞破膜与固定封闭非特异性结合位点染色与分析基本方法了解方法学评价优点：特异、高效、灵敏.应用:对单个细胞水平CK或AM检测；检测细胞内CK；膜上AM、CK受体同一细胞内两种以上细胞因子表达齐齐哈尔医学院免疫熟悉四、酶联免疫斑点试验(ELISPOT)包被有待测细胞因...
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