流式检测淋巴细胞亚群在流式检测淋巴细胞亚群在临床中的应用临床中的应用流式细胞仪的基本原理、特点、及应用范围常规淋巴细胞亚群检测的检测方法、临床意义及具体应用流式细胞仪检测原理流式细胞仪检测原理什么是什么是FCMFCM??流式细胞术:利用流式细胞仪对处于快速流动的细胞流式细胞术:利用流式细胞仪对处于快速流动的细胞或生物颗粒进行多参数、快速的定量分析及分选的技术或生物颗粒进行多参数、快速的定量分析及分选的技术细胞荧光化学技术细胞荧光化学技术++单克隆抗体技术单克隆抗体技术++激光技术激光技术++流流体力学体力学++光电测量技术光电测量技术++计算机技术计算机技术FCMFCM的特点的特点测量速度快:最快可在测量速度快:最快可在11秒种内检测上万个细胞秒种内检测上万个细胞可进行多参数测量:可以对同一个细胞做有关物理、化学可进行多参数测量:可以对同一个细胞做有关物理、化学特性的多参数测量特性的多参数测量具有明显的统计学意义:提供细胞群体的均值和分布情况具有明显的统计学意义:提供细胞群体的均值和分布情况高分辨率高分辨率(CV<2%)(CV<2%)、高灵敏度、高灵敏度((荧光检测灵敏度荧光检测灵敏度≤≤100MESF100MESF,前向角散射光检测灵敏度,前向角散射光检测灵敏度(0.20.5um)∼(0.20.5um)∼既是细胞分析技术,又是精确的分选技术,分选纯度可达既是细胞分析技术,又是精确的分选技术,分选纯度可达99%99%以上以上流式细胞仪的检测范围流式细胞仪的检测范围细胞结构细胞结构细胞大小细胞大小细胞颗粒度细胞颗粒度细胞表面面积细胞表面面积核浆比例核浆比例DNADNA含量与细胞周期含量与细胞周期RNARNA含量含量蛋白质含量蛋白质含量细胞功能细胞功能细胞表面细胞表面//胞浆胞浆//核的特核的特异性抗原异性抗原细胞活性细胞活性细胞内细胞因子细胞内细胞因子酶活性酶活性激素结合位点激素结合位点细胞受体细胞受体流式细胞仪流式细胞仪FACSCaliburFACSAriaFACSCantoLSRIIFACSCountFACSVantage常用荧光素激发、发射、光源波长以及适用机型常用荧光素激发、发射、光源波长以及适用机型IVDIVD::体外临床诊断试剂体外临床诊断试剂RUORUO::科研用试剂科研用试剂以上两类抗体均有多种荧光标记可供实验以上两类抗体均有多种荧光标记可供实验的组合搭配,除单色试剂外,还有多色组合试剂,的组合搭配,除单色试剂外,还有多色组合试剂,便于实验操作。便于实验操作。免疫学方面免疫学方面淋巴细胞亚群及细胞活化分析、免疫功能监测、淋巴细胞亚群及细胞活化分析、免疫功能监测、HLA-B27HLA-B27的检测等的检测等血液学方面血液学方面白血病和淋巴瘤的免疫分型、造血干细胞计数、白血病和淋巴瘤的免疫分型、造血干细胞计数、PNHPNH诊诊断、断、PLTPLT功能、网织红细胞和网织血小板计数等功能、网织红细胞和网织血小板计数等肿瘤病理学方面肿瘤病理学方面肿瘤组织或脱落细胞的增殖周期和肿瘤组织或脱落细胞的增殖周期和DNADNA倍体分析、肿瘤倍体分析、肿瘤细胞和白细胞的多药耐药性检查、肿瘤细胞表面标记及癌基细胞和白细胞的多药耐药性检查、肿瘤细胞表面标记及癌基因产物分析等。因产物分析等。淋巴细胞淋巴细胞::TT淋巴细胞:淋巴细胞:特异性细胞免疫应答特异性细胞免疫应答BB淋巴细胞:淋巴细胞:特异性体液免疫应答特异性体液免疫应答NKNK细胞:细胞:自然杀伤细胞,固有免疫自然杀伤细胞,固有免疫淋巴细胞亚群检测的检测方法淋巴细胞亚群检测的检测方法主要检测项目:主要检测项目:总总TT、、BB细胞细胞判断免疫缺陷和自身免疫性疾病判断免疫缺陷和自身免疫性疾病ThTh和和TsTs细胞细胞检测免疫缺陷病(如检测免疫缺陷病(如SCIDSCID、、AIDSAIDS患者)、自身免疫性疾患者)、自身免疫性疾病(如病(如SLESLE、急性、急性GVHDGVHD和移植排斥患者)和移植排斥患者)Th/TsTh/Ts升高:自身免疫性疾病(类风湿性关节炎、升高:自身免疫性疾病(类风湿性关节炎、SLESLE))降低:病毒感染、恶性肿瘤、再生障碍性贫血降低:病毒感染、恶性肿瘤、再生障碍性贫血NKNK细胞细胞介导对某些肿瘤细胞和病毒感...