闽东医院病理科张驰2015.12.04病理技术•病理技术是病理学的一个重要分支，是病理学研究中的方法学，是病理诊断的基础。常规病理是病理技术最重要的部分，任何病理诊断离不开它。常规病理1、收标本8、切片2、取材9、染色3、固定10、封固4、脱水11、对片5、透明12、交诊6、浸蜡13、诊断7、包埋14、发报告固定•通过添加固定剂让组织中的所有细胞及细胞外成分迅速死亡，以免细胞中溶酶体成分的破坏作用，保持离体组织细胞与活组织时的形态相似，并防止细菌繁殖所致的腐败，以保存蛋白质与核酸的基本结构。病理标本的制作和组织切片都必须先进行固定。常用固定液的种类1.4%甲醛2.95%乙醇3.乙醇-甲醛AF液4.AAF液5.中性缓冲甲醛液脱水用某些溶剂逐渐将组织内吸收的水分置换出来，以利于透明剂和石蜡的渗入，这一过程叫脱水。常用脱水剂的种类1.酒精2.丙酮3.正丁醇4.叔丁醇5.异丙醇酒精：为最常用的脱水剂。高浓度的酒精对组织有强烈的收缩和脆化的缺点，因此组织在水洗后不能立即投入高浓度的酒精中。应在不同浓度的酒精里逐渐脱水，一般在可从70%酒精开始80%、95%、100%酒精，逐步脱水。组织透明当组织全部为透明剂占有时，光线可以透过，组织可呈现不同程度的透明状态，这中现象称为组织透明。目的：使石蜡能浸入组织块，便于包埋。多数脱水剂不能与石蜡相混合，必须通过透明剂的作用长能浸蜡包埋。透明剂的种类•二甲苯•苯和甲苯•氯仿•苯甲酸甲酯•香柏油•冬青油•松油醇特性二甲苯:为最常用的常规透明剂，为无色透明液体，易溶于无水酒精，不溶于水，有毒，易挥发，长期接触对呼吸道粘膜有刺激作用。透明力强，易使组织收缩、变脆，所以组织块在二甲苯中的时间不宜过长。小块的组织以30分钟为宜,较大的组织快可适当延长。注意事项透明的关键是时间,透明时间不够,石蜡不能完全进入组织,影响到包埋切片.但是如果透明过度,组织发硬发脆影响切片质量.特别是肝脾等组织.透明是制片过程中很重要的环节，若干组织不能透明，其原因一般与组织脱水未尽有关。浸蜡组织透明后，在融化的石蜡内浸渍的过程称浸蜡。•目的组织经过透明后要浸入石蜡内,目的是去除组织中的透明剂(二甲苯)而代之以石蜡,并渗入组织内部,把软组织变为有适当的硬度,以利切片。浸蜡的方法•一般浸蜡须经过2到3次,目前常用的脱水机上是2-3个蜡缸。浸蜡时间约需3-4小时。浸蜡时间根据组织的种类和大小及温度的高低来具体制定。时间不宜过长，否则易造成组织变硬、脆，切片如豆渣样；时间不足，则不易切成完好的切片。用于浸蜡的石蜡的溶点为56-58度。组织包埋组织块经过透明、浸蜡，用包埋剂包起来的过程称包埋。目的：包埋后可使组织达到一定的硬度和韧度，有利于切成薄片。包埋面的选择1.一般情况下以组织块的最大面为包埋面。2.管囊状结构的组织以横断面为包埋面。3.皮肤组织或有被覆上皮组织，包埋面应垂直于上皮面。4.带有病变特点的组织，或对包埋面有特别要求的组织应按预先标记的包埋面包埋。注意事项1.包埋用石蜡有杂质应过滤后再使用。2.用酒精灯或包埋加热器，防止熔蜡凝固。3.夹持组织块的镊子，不能加热过度，以防烫伤组织。4.包埋蜡的温度与组织块的温度应接近，否则易引起组织块与周围蜡块的脱裂。5.号码、组织应对应，不能遗失。切片质量的基本标准•组织切面完整，内镜咬检、穿刺标本切面数6个•切片薄3-5微米，厚薄均匀•切片无刀痕、裂隙、颤痕•切片平坦，无皱褶、折叠•切片无污染、无气泡、盖玻片周围无胶液外溢•细胞核与细胞质染色对比清晰•切片无松散，裱贴位置适当•切片整洁，标签端正粘牢，号码清晰HE染色HE染色法，即是苏木精-伊红染色法。石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。易于被碱性或酸性染料着色的性质分别称为嗜碱性和嗜酸性；若于两种染料的亲和力都不强，则称中性。一般的组织变化和组织产物都可以通过这一染色法显示出来。是形态学最常用的染色方法•(一)脱蜡:1.从温箱中取出烤干的切片,立即投入二甲苯中脱蜡5～15min(可在三瓶中进行),脱蜡时间长短...
