微生物实验实验日期: 2017.11.1 实验班级: 生物技术指导教师: 张建丽姓名: 高熹学号: 1120152430 测定细菌生长曲线一.实验目的1.通过对大肠杆菌生长曲线的测定,了解细菌生长的特点,综合训练微生物实验的基本实验技能。2.巩固培养基的配制、灭菌、仪器的包扎、倒平板。3.掌握用比浊法测定细菌的生长曲线。二.实验原理将少量细菌接种到一定体积的、 适合的新鲜培养基中, 在适宜的条件下进行培养,一定时间测定培养液中的菌量,以菌量的数量作纵坐标, 生长时间作横坐标,绘制的曲线叫生长曲线。 它反映了单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。 依据其生长速率的不同, 一般可把生长曲线分为延缓期、生长期、 稳定期和衰亡期。 将每一种一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、 稳定期和衰亡期四个阶段。延迟期:又叫调整期。 细菌接种至培养基后, 对新环境有一个短暂适应过程(不适应者可因转种而死亡) 。此期曲线平坦稳定,因为细菌繁殖极少延迟期长短因素种、接种菌量、菌龄以及营养物质等不同而异,一般为1~4 小时。此期中细菌体积增大,代谢活跃,为细菌的分裂增殖合成、储备充足的酶、能量及中间代谢产物。对数生长期: 又称指数期。 此期生长曲线上活菌数直线上升。细菌以稳定的几何级数极快增长,可持续几小时至几天不等(视培养条件及细菌代时而异)。此期细菌形态、染色、生物活性都很典型,对外界环境因素的作用敏感,因此研究细菌性状以此期细菌最好。抗生素作用,对该时期的细菌效果最佳。稳定期:该期的生长菌群总数处于平坦阶段,但细菌群体活力变化较大细菌浓度达到最大即环境最大容纳量。由于培养基中营养物质消耗、毒性产物(有机酸、过氧化物等)积累PH下降等不利因素的影响,细菌繁殖速度渐趋下降,相对细菌死亡数开始逐渐增加,此期细菌增殖数与死亡数渐趋平衡。细菌形态、染色、生物活性可出现改变,并产生相应的代谢产物如外毒素、内毒素、抗生素、以及芽孢等。衰亡期:随着稳定期发展,细菌繁殖越来越慢,死亡菌数明显增多。活菌数与培养时间呈反比关系, 此期细菌变长肿胀或畸形衰变,甚至菌体自溶, 难以辩认其形。生理代谢活动趋于停滞。故陈旧培养物上难以鉴别细菌。体内及自然界细菌的生长繁殖受机体免疫因素和环境因素的多方面影响,不会出现象培养基中那样典型的生长曲线。掌握细菌生长规律, 可有目...