下载后可任意编辑《生物分离与纯化技术》授课教案第四章 色谱分离技术教学目的: 了解色谱分离技术的特点和应用; 熟悉吸附色谱分离技术的概念、 分类、 特点及其应用; 熟悉离子交换色谱技术的概念、 特点及其应用; 掌握凝胶色谱分离技术的操作及应用; 掌握亲和色谱分离技术常见载体和配基及其制备方法, 掌握亲和色谱分离技术的操作; 掌握高效液相色谱分离技术常见的固定相、 流动相及其选择方法, 掌握高效液相色谱分离技术的操作。教学重点: 离子交换色谱技术的概念、 特点及其应用, 凝胶色谱分离技术的操作及应用, 亲和色谱分离技术常见载体和配基及其制备方法, 高效液相色谱分离技术的操作。教学难点: 亲和色谱分离技术的操作; 高效液相色谱分离技术常见的固定相、 流动相及其选择方法。教学课时: 16 学时教学方法: 多媒体教学教学内容: 第一节 概述一、 色谱分离技术的概念色谱技术是一组相关分离方法的总称, 色谱柱的一般结构含有固定相( 多孔介质) 和流动相, 根据物质在两相间的分配行为不同( 由于亲和力差异) , 经过多次分配( 吸附-解吸-吸附-解吸…) , 达到分离的目的。二、 色谱分离系统的组成下载后可任意编辑三、色谱分离技术的分类但常见于生物大分子分离的色谱方法, 按机理分, 有以下几种: 吸附色谱、 分配色谱、 离子交换色谱、 凝胶色谱等四、 色谱分离技术的特点1.分离效率高, 每米柱长可达几千至几十万的塔板数; 2.应用范围广, 从极性到非极性、 离子型到非离子型、 小分子到大分子、 无机到有机及生物 3.活性物质, 以及热稳定到热不稳定的化合物, 特别是对生物大分子样品的分离, 是其它方法无法代替的; 4.选择性强; 5.高灵敏度的在线检测, 可采纳不同的高灵敏度检测器进行连续的在线检测; 6.快速分离; 7.过程自动化操作。第二节 吸附色谱分离技术1、 原理: 利用溶质与吸附剂之间的分子吸附力(范德华力, 包括色散力、 诱导力、 定向力以及氢键)的差异而实现分离下载后可任意编辑2、 关键要素: 吸附剂( 固定相) 和展开剂( 流动相) 的选择3、 吸附剂: 氧化铝、 硅胶、 聚酰胺等, 均含有不饱和的氧原子或氮原子以及能够形成氢键的基团, 如-OH 和-NH24、 常见的吸附剂: 氧化铝、 硅胶、 活性炭、 纤维素、 聚酰胺、 硅藻土5、 展开剂的选择展开剂极性越大, 对同一化合物的洗脱能力越大因此, 能够根据实验结果调整展开剂的极性以获得最佳的分...
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