细胞化学染色检验前言 细胞化学是细胞和化学相结合的一门科学。细胞化学染色是根据化学反应的原理,应用涂片染色的方法,观察细胞的化学成分及其变化的重要方法。在病理情况下,血细胞的化学成分可发生改变。因此,细胞化学染色不仅对研究血细胞的代谢活动、生理功能,而且对生理和病理情况下血细胞的化学成分的变化、各种类型血细胞的鉴别、某些血液病的鉴别诊断、疾病的疗效观察以及发病机制的探讨均有重要意义。研究血细胞的化学物质较多,如各种酶类、脂类、糖元、铁等。下面主要介绍血液学中常用的一些细胞化学染色方法。 瑞氏染色法: 瑞氏染色液的配制: 瑞氏染料(粉)1g 纯甲醇 60ml 将染料放在乳钵内加少量甲醇研磨使染料溶解,然后将已溶解得倒入洁净的玻璃瓶内,剩下未溶解的再加少量甲醇研磨,如此继续操作,直到全部染料溶解及用完甲醇为止。制配好的染液保存于温室中一周便可应用。新鲜配制的染液偏碱性,放置后可呈酸性,染液储存愈久染色愈好。 缓冲液的配制及其作用: 1% KH2PO4 (即 1g KH2PO4+100ml 蒸馏水) 30ml 1% Na2HPO4 20ml 加蒸馏水至 1000ml PH 6.4~6.8 过氧化物酶染色 一、原理: 细胞中的过氧化物酶(POX)分解底物过氧化氢(H2O2)产生新生态氧,后者使联苯胺氧化为联苯胺蓝沉淀而定位于POX活性部位。 二、过氧化物酶染色法染液的配制: (1)联苯胺(Benzidine) 0.3g 95%乙醇(Ethye alcohol) 99ml 36%亚硝基铁氰化钠(Sodium Nitroprusside) 1ml (0.36g+1ml 蒸馏水,置于37℃水浴箱中促溶。) (2)30%mlml 过氧化氢溶液: 30%双氧水,吸取一滴约 0.05ml 放入 50ml 蒸馏水内,每次用时必须新鲜配制。 三、结果判断: 细胞质中有蓝色颗粒的为阳性细胞。 四、临床意义: 粒细胞中除早期原粒细胞呈阴性反应外,晚期原粒细胞及以后各阶段粒细胞均呈阳性反应,细胞越成熟反应越强。 单核系细胞:原单核细胞呈阴性反应,幼单核细胞及成熟单核细胞多呈弱阳性反应。 淋巴系.巨核系.红系细胞均呈阴性反应。POX反应主要用于白血病的鉴别。 (一)过氧化物酶染色阳性 急性原粒细胞性白血病(M1、M2型)、急性早幼粒细胞性白血病(M3型)急性粒单细胞性白血病(M4型)、急性单核细胞性白血病(M5型)、急性红白血病(M6型)均可呈阳性反应,阳性率>3%。M3型阳性反应最强,M5型反应最弱。 (二)过氧化物酶染色阴性 急性淋巴细胞性白血病、急性巨核细胞性白血病...