培 养 细 胞 的 冷 冻 保 存 与复苏 概述 冻 存 过 程 冷 冻 保 存 与复苏的 原理 冻 存 结 果 冷 冻 速 率 讨 论 冷 冻 保 存 温 度 冻 存 细 胞 的 复苏 复 温 速 率 非 玻 璃 化 冻 存 细 胞 的 复 苏 冷 冻 保 护 剂 主 要 材 料 冷 冻 保 存 方法 复 苏 过 程 非 玻 璃 化 冻 存 方 法 结 果 主 要 材 料 讨 论 冻 存 过 程 玻 璃 化 冻 存 细 胞 的 复 苏 冻 存 结 果 主 要 材 料 讨 论 复 苏 过 程 玻 璃 化 冻 存 方 法 结 果 主 要 材 料 讨 论 Polge 等 人 （ 1949） 发 现 了 甘 油 对 低 温 下 贮 存 的 细 胞 具 有 保 护 作 用 ， 他 们 仍然 以 精 子 进 行 研 究 发 现 ， 加 入 甘 油 能 够 大 大 提 高 贮 存 于 -790C 下 精 子 的 存 活 率 。接 下 来 的 重 大 进 展 是 Lu y et（ 1951） 与 Lov elock（ 1953） 等 多 位 学 者 发 现 了 电 解质 浓 度 对 贮 存 细 胞 的 损 伤 作 用 。 他 们 的 结 论 是 ， 电 解 质 浓 度 增 大 是 造 成 贮 存 细 胞损 伤 的 主 要 原 因 。 冷 冻 理 论 后 来 得 到 Merry man（ 1956） 、Rey（ 1957） 以 及 Smith（ 1961） 等 学 者 的 继续和发 展 。 1949 年 至 1960 年 这 一 段 时 间 可 以 称 为 冷 冻 保 存 的 “甘油时 期”，这 一 时 期对生物材料的 冷 冻 保 存 一 般都是以 甘油作为 保 护剂。Lo v elo ck（1959）等人发现了一 种新的 化学保 护剂，这 就是人们熟悉的 二甲基亚砜（DMSO）。而且，用于冷 冻 保 存 的 仪器也有明显的 发展。目前，无论是冷 冻 保 存 理论、各种保 护剂、冷冻 用品和设备以 及各种生物材料的 保 存 与复苏技术都已十分成熟和完备。 冷 冻 保 存 与复苏原理 在低于-700C 的 超低温条件下，有机体细胞内部的 生化反应极其缓慢，甚至终止。水在低于零度的 条件下会结冰。如果将细胞悬浮在纯水中，随着温度的 降低，细胞内外的 水分都会...
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