抗生素敏感实验——纸片扩散 原理:纸 片 扩 散 法 是 将 含 有 定 量 抗 菌 药 物 的 滤 纸 片 贴 在 已 接 种 了 测 试 菌 的 琼 脂 表 面 上 ,纸 片 中 的 药 物 在 琼 脂 中 扩 散 , 随 着 扩 散 距 离 的 增 加 抗 菌 药 物 的 浓 度 呈 对 数 减 少 , 从 而 在 纸片 的 周 围 形 成 一 种 浓 度 梯 度 。在 药 物 扩 散 的 同时, 纸 片 周 围 抑菌 浓 度 范围 内的 测 试 菌 不能生长, 而 抑菌 浓 度 范围 外的 菌 株则继续生长, 从 而 在 纸 片 的 周 围 形 成 透明的 抑菌 圈。不同抗 菌 药 物 抑菌 圈的 直径因受药 物 在 琼 脂 中 的 扩 散 速率的 影响而 可能不同, 抑菌 圈的 大小可反映测 试 菌 对 测 定 药 物 的 敏感程度 , 并与该药 对 测 试 菌 的 最低抑菌 浓 度 (M IC)呈 负相关, 即抑菌 圈越大, M IC 越小 原 理 通 俗说法:将 含 有 定 量 抗 菌 药 物 的 纸 片 贴 在 已 接 种 测 定 菌 的 琼 脂 平板上 , 纸 片 中 所含 的 药 物 吸取琼 脂 中 的 水分, 溶解后便不断的 向纸 片 周 围 区域扩 散 形成 递减 的 梯 度 浓 度 。在 纸 片 周 围 抑菌 浓 度 范围 内测 试 菌 的 生长被抑制, 从 而 形 成 透明的 抑菌 圈。该抑菌 圈表 示药 物 对 该种 细菌 的 生长繁殖具有 抑制作用。通过测 定 抑菌 圈的 直径大小, 可以判定 药 物 的 抑菌 强弱, 抑菌 圈直径越大表 示药 物 抑菌 作用越强, 抑菌 圈直径越小表 示药 物 抑菌 作用弱, 没有 抑菌 圈表 示该药 物 没有 抑菌 作用。并且, 经稀释法 测 得的 M IC 的 对 数 和用纸 片 测 定 相应的 菌 株得到的 抑菌 直径之间大致呈 直线相关,因此将 两种 方法 相对 应地测 试 各种 据菌 株所得数 据, 进行统计学的 相关回归分析处理,可得到一 条回归线, 依此可推断该菌 株的 M IC, 两者呈 负相关关系, 即M IC 愈小, 抑菌 圈直径愈大。 材料(以大肠杆菌为例): 1.药品及细菌——诺氟沙星、新霉素、硫酸链霉素、氟苯尼考、卡那霉素、泰乐菌素、生理盐水、磷酸盐缓冲液、MH 营养肉汤、MH 琼脂培养基、...