J I A N G S U U N I V E R S I T Y 实 验 报 告 系别：药 学 院 班级：制药0 9 0 1 姓名：张 丽 琴 学号：3 0 9 0 9 0 2 0 0 7 实验二 紫外-可见分光光度计的使用 一、 试验目的 1、 了解紫外-可见分光光度计的基本结构与特点，掌握仪器的使用方法。 2、 熟悉测绘吸收曲线的一般方法 3、 掌握紫外-可见分光光度法定量的方法 4、 熟悉平行原则的应用 二、 试验原理 电子跃迁原理 三、 实验步骤 （一）仪器的使用方法 1、接通电源，打开样品室盖，预热 20min 2、比色皿的使用：比色皿不用时浸泡于醇溶液中；使用时手拿比色皿的毛玻璃面，将比色皿用蒸馏水冲洗几遍，然后用待测溶液冲洗两次，然后将待测溶液加入比色皿中，加入溶液体积约为比色皿的2/3或 3/4；将比色皿外壁用卷纸擦干，并且保持透光面洁净，不能有影响光透过的纸屑或痕迹。将比色皿放入光路中，注意比色皿在光路中的方向最好始终保持一致； 3、选择波长，比色皿中置空白溶液，打开样品室盖调节使 T读数为零，关上样品室盖调节使 T 为 100%，反复调节几次，直至读数稳定。(注：改变波长时均需重新调 0和 100%) 4、比色皿配对。将其他比色皿盛放相同的空白溶液，测定其他比色皿与刚才调 0，调 100%的比色皿的吸光度差值，并且记录。选择吸收值小的比色皿作为对照皿；记录其他比色皿与对照比色皿的差值。测定时顺序勿颠倒。 5、测定物质吸光度。测定时溶液浓度从稀到浓测定。每次荡洗比色皿 1~2次。注意勿将溶液洒于样品室，否则须立即擦干。 6、记录吸光度值。 7、测定完毕洗净比色皿，置于醇溶液中，关闭电源。 （二）标准曲线的制作样品溶液的测定： 1. 配置浓度为 0.5000mg/ml的标准苯甲酸钠储备液 100ml。 2. 标准溶液的配置 分别吸取标准苯甲酸钠储备液 1.00ml、2.00ml、3.00ml、4.00ml、5.00ml至 5只 100ml量瓶中，用0.1mol/L HCl溶液（9→1000）稀释至刻度，定容，得系列浓度的标准苯甲酸钠溶液。（预先已经配好） 3. 标准曲线的制作 以 0.1mol/L HCl溶液为参比，分别测定各溶液在 240nm处的吸收度 A值，以 A为 y轴，进行线性回归，得工作曲线和相关系数 r。 4. 样品溶液测定：精密吸取样品溶液 2.0ml至 100ml容量瓶，用0.1M HCl稀释至刻度。 5. 计算样品液的浓度。 6、数据记录： 编号 1 2 3 4 5 6 待测液体 C(μ g/ml) 0 5 10 15 20 25 A240nm...
VIP
