文件名称 紫外-可见分光光度法 文件编码 KYFX-YQCZSOP-021 编 制 人 编制日期 年 月 日 颁发部门 科研部 审 核 人 审核日期 年 月 日 复 印 号 批 准 人 批准日期 年 月 日 生效日期 年 月 日 分发部门 电热恒温水浴锅标准操作规程 第 1 页 共 7 页 紫外-可见分光光度法标准操作规程 1 简述 紫外光-可见分光光度法是通过被测物质在紫外光区或可见光区的特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。本法在药品检验中主要用于药品的鉴别、检查和含量测定。 定量分析通常选择物质的最大吸收波长处测出吸收度，然后用对照品或吸收系数求算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定；对已知物质定性可用吸收峰波长或吸光度比值作为鉴别方法；若该物质本身在紫外光区无吸收，而其杂质在紫外光区有相当强度的吸收，或杂质的吸收峰处该物质无吸收，则可用本法作杂质检查。 物质对紫外辐射的吸收是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生，因此，紫外吸收主要决定于分子的电子结构，故紫外光谱又称电子光谱。有机化合物分子结构中如含有共轭体系、芳香环等发色基团，均可在紫外区(200～400nm)或可见光区(400～850nm)产生吸收。通常使用的紫外-可见分光光度计的工作波长范围为 190～900nm， 紫外吸收光谱为物质对紫外区辐射的能量吸收图。朗伯—比尔(Lambert-Beer)定律为光的吸收定律，它是紫外分光光度法定量分析的依据，其数学表达式为： A=log（1/T）=Ecl 式中：A 为吸光度； T 为透光率； E 为吸收系数； c 为溶液浓度； l 为光路长度。 如溶液的浓度(c)为 1%(g/ml)，光路长度(l)为 1cm，相应的吸光度即为吸收系数，以%11cmE表示。如溶液的浓度(c)为摩尔浓度(mol/L)，光路长度为 lcm 时，则相应有吸收系数为摩尔吸收系数，以ε 表示。 2 仪器 紫外-可见分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据处理系统等部分组成。 为了满足紫外-可见光区全波长范围的测定，仪器备有二种光源，即氘灯和碘钨灯，前者用于紫外区，后者用于可见光区。 单色器通常由进光狭缝、出光狭缝、平行光装置、色散元件、聚焦透镜或反射镜等组成，色散元件有棱镜和光栅二种，棱镜多用天然石英或熔融硅石制成，对 200～400nm 波长光的色散能力很强，对文件名称 紫外-可见分光光度法 文件编码 KYFX-YQCZSOP-021 编 制 人 编制日期 年 月 ...
VIP
