侯总吐血推荐 : 新一代 DNA 测序技术总览 By 华大基因 & 生物谷 2011 年12 月 07 日 13:37:16 作者：尹银亮、陈会平、毛良伟译 来源：生物谷原文刊登于《分析化学》综述Analytical Chemistry 原文标题： Landscape of Next-Generation Sequencing Technologies 索引信息： dx.doi.org/10.1021/ac2010857 | Anal. Chem. 2011, 83, 4327–4341 原文作者： Thomas P. Niedringhaus, Denitsa Milanova, Matthew B. Kerby, Michael P. Snyder,and Annelise E. Barro 译者资料：尹银亮，香港华大基因研发中心有限公司 email：stevenyinbio@hotmail.com陈会平，毛良伟，武汉华大基因科技有限公司【内容】第二代测序第二代测序成本第三代测序技术单分子测序法边连接边测序法边合成边测序法纳 M 孔测序技术蛋白质纳 M 孔测序法固态纳 M 孔测序法长距离阅读 DNA 的扩展方法总结性评论DNA 测序正处在技术上天翻地覆剧变的阵痛之中，其突出特点是，测序通量（测序数据量）的大幅增长，原始数据中每个碱基的测序成本急剧下跌，并伴随着以巨资购买仪器以引进新技术的需求。以前看似高不可攀的奢侈性研究活动（如个人基因组测序，宏基因组学研究，以及对大量重要物种的测序），在短短几年之间，正以急速的步伐而变得越来越切实可行了。本篇综述将集中讨论在第三，第四代测序方法背后的故事：它们所面临的挑战；各种方法的局限性；以及它们带给我们的充满诱惑的前景。第一代 DNA 测序技术用的是1975 年由桑格（ Sanger）和考尔森（ Coulson）开创的链终止法或者是1976-1977 年由马克西姆（ Maxam ） 和吉尔伯特（Gilbert）发明的化学法（链降解）. 在 1977 年，桑格测定了第一个基因组序列，是噬菌体 X174 的，全长 5375 个碱基。其测序方法和历史过程以前已做过详细回顾。后来的四色荧光桑格测序法（每一种荧光代表四种碱基中的一种）被用在自动毛细管电泳测序系统中，此系统由应用生物系统有限公司（Applied Biosystems Inc. ）推上市场，后来该公司被整合入生命技术公司(Life Technologies) 和贝克曼 .考尔特公司 (Beckman Coulter inc.) （见表 1）。 发表于 2001 年的第一个人类基因组复合序列就是大体上由细管电泳测序系统来测定完成的，不仅耗资庞大，花费人力无数，而且历时超过十年。尽管发表于2001 年的基因组仍然处于有待完善的过程中，但其作为基因组的"参照...
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