试剂配制 （1）液体LB 培养基（-） 1000m l 蛋白胨 10g 酵母提取物 5g 氯化钠 10g 去离子水溶解并定容至 1000m l 高压灭菌，4℃保存。 （2）氨苄青霉素溶液（100m g/m l） 10m l 氨苄青霉素 1g 去离子水溶解并定容至 10m l 过滤除菌，-20℃分装保存。 （3）卡那霉素溶液（100m g/m l） 10m l 卡那霉素 1g 去离子水溶解并定容至 10m l 过滤除菌，-20℃分装保存。 （4）固体LB 培养基（-） 1000m l 蛋白胨 10g 酵母提取物 5g 氯化钠 10g 琼脂糖粉 15g 去离子水溶解并定容至 1000m l 高压灭菌后铺平板（6cm 培养皿），冷却后 4℃保存。 （5）含抗生素 LB 固体培养基 1000m l 固体LB 培养基溶液 1000m l 高压灭菌, 当培养基降温至50℃左右，加入终浓度为 100μg/ml 的氨苄青霉素或 100μg/ml 卡那霉素，并铺平板（6cm 培养皿），冷却后， 4℃保存。 （6）0.1M CaCl2 溶液— 制备感受态 1000m l 氯化钙 11.099g 去离子水溶解，定容至 1000m l 高压灭菌后 4℃保存。 （7）0.1M MgCl2 溶液---制备感受态 1000m l 氯化镁 9.521g 去离子水溶解，定容至 1000m l 高压灭菌后 4℃保存。 （8）0.1M CaCl2-15%甘油溶液----制备感受态 1000ml 氯化钙 9.521g 50%甘油 300ml 去离子水溶解，定容至 1000ml 高压灭菌后4℃保存。 （9）50％甘油溶液 100ml 甘油 50ml 去离子水 50ml （10）0.5M EDTA 溶液(PH=8.0) 500ml EDTA 93.05g 去离子水溶解，NaOH 调 PH 至8.0，定容至500ml。 （11）10%SDS 溶液 100ml SDS 10g 去离子水溶解，定容至100ml。 （12）5M 乙酸钾溶液 100ml 5M 乙酸钾 49.07g 去离子水溶解，定容至100ml，室温保存。 （13）1MTris-HCl 溶液（pH=8.0） 100ml Tris 碱 12.1g 去离子水溶解，定容至100ml，浓盐酸调 pH 值至8.0，室温保存。 （14）50× TAE 溶液 100ml Tris 碱 242g 冰乙酸 51.7ml 0.5M EDTA 100ml 加去离子水溶解定容至100ml，室温保存。 （15）1% 琼脂糖凝胶溶液 500ml 琼脂糖粉 5g 1× TAE 500ml 微波炉中高火加热 3-5min，存放于 50℃电热鼓风干燥箱。 （16）碱裂解液I（P1 液） 200ml 葡萄糖 1.8g 1MTris-HCl（pH=8.0） 5ml 0.5M EDTA（pH=8.0） 4ml 加去离子水至 200ml 高压灭菌后4℃保存。 （17）碱裂解液 II（P2 液） 200ml 10M NaO...
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