1 . 1 乙 肝 表 面 抗 原 检 测 操 作 规 程 ( 共6 页 )--本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页能够根据需求调节适宜字体及大小--乙型肝炎病毒表面抗原检测（ELISA）1 原理： 在微孔板上预包被被纯化的乙肝表面抗体（HBsAb），配以酶标记抗体（HbsAb-HRP）及 TMB 等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清（或血浆）中乙肝表面抗原（HBsAg）。2 试剂： 试剂名称：乙型肝炎病毒表面抗原诊疗试剂盒（酶联免疫法） 试剂生产厂家：英科新创（厦门）科技有限公司 包装规格：96Test/Kit 试剂盒构成：HbsAb 预包被微孔板（包被HbsAb），HbsAg 酶标抗体（含 HRP 标记 HbsAb）, HbsAg 阳性对照（含基因工程 HbsAg），HbsAg 阴性对照（正常人血清），HbsAg 样品稀释液（含 BSA 缓冲液），浓缩洗涤液（PBS-T 缓冲液），底物 A（含 H2O2），底物 B（含 TMB），终止液（含 H2SO4），封板膜，自封袋，阐明书。 试剂储存条件及使用期：2~8℃避光保存，有效 12 个月。3 样本采集： 取静脉血 3-4ml 于干净容器中分离出血清或血浆标本，如不及时测定可置于 4℃冰箱保存，如长久保存需置于-15至-20℃冻存，并避免样本重复冻融。高脂血、高胆红素及溶血样本可能会影响实验成果的精确性，建议不使用。4 所需仪器全自动酶免分析仪新鲜蒸馏水或去离子水酶标仪（单波长 450nm 或双波长 450nm/630nm）微量移液器 37℃恒温箱或水浴箱洗板机或洗瓶5 检查办法 平衡：将试剂盒各组分从盒中取出，平衡至室温（18~25℃），微孔板板开封后，余者即时以自封袋封存。 配液：浓缩洗涤液配备前充足摇匀（如有晶体应充足溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水去离子水按 1：19 稀释后使用。 编号：取所需数量微孔条固定于支架，按序编号。 稀释：每孔加入 20ul 样品稀释液。 加样：分别在对应孔中加入 100ul 阴、阳性对照血清或待测样本。 温育：置 37℃温育 60min。 加酶：分别在每孔中加入酶标记抗体 50ul。 温育：置 37℃温育 30min。 洗涤：用洗涤液充足洗涤 5 次、洗涤后扣干（每次应保持30~60s 的浸泡时间）。 显色：每孔加入底物 A、B 各 50ul，轻拍混匀，37℃暗置 30min。 终止：每孔加入终止液 50ul，混匀。 测定：用酶标仪单波长 450nm 或双波长 450nm/630nm 测定各孔 OD 值（用单波长测定时，需用空白对照调零），并统计成果。6 成果鉴定与分析 临界值（.）的计算：临界...
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