61 微生物程度检测 （MICROBIAL LIMIT TESTS）此章提供办法来检测可能存在的好氧微生物其它制药过程中可能出现的微生物的数量，涉及原材料和成品中的。如果通过验证确承认以得到相似或更加好的检测结论，也允许采用自动化的检测办法。在样品检测过程中须进行无菌操作。若无特别阐明，则“培养（incubate）”一词指在 30—35℃的培养箱内培养 24 至 48 小时；“生长（growth）”一词用于专门的鉴定，阐明“存在和可能存在活的微生物”。准备实验 (Preparatory Testing)本章涉及实验成果的有效性取决于：提供的被检测样品本身在实验条件下，被充足证明不会克制可能存在的微生物的生长。因此，在准备样品时，需要正规的实验操作和符合规定的实验条件，接种稀释样品到含有下列（微生物）培养物的培养基：金黄色（奥里斯）葡萄球菌 （Staphylococcus aureus）,大肠埃希氏菌（Escherichia coli）, 铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa), 和沙门氏菌（Salmonella）。办法以下： 将用肉汤培养基培养 24 小时后的（微生物）不不大于 10-3 稀释的微生物培养物，加 1 ml（微生物）培养液到磷酸(盐)缓冲液(pH 7.2)，液体大豆酪蛋白消化物培养基（Fluid Soybean-Casein Digest Medium），或者液体乳糖培养基（Fluid Lactose Medium）。对应培养基培养失败则需要采用下列办法更改检测程序： （1） 增加稀释液体积，检测样品加入量仍维持不变；或者 （2） 中和一定数量的干扰因子；或者 （3） 结合（1）、（2）得出适宜条件，使接种物得以生长。下列是某些物质的成分和浓度，该物质及浓度可用于加入培养基、制止物质发挥抑菌作用： 大豆卵磷脂（soy lecithin, 0.5%）或者聚山梨醇酯 20（polysorbate 20, 4.0%）。然后重复前面的实验，用液体酪蛋白消化物-大豆卵磷脂-聚山梨醇酯 20（Fluid Casein Digest-Soy lecithin-Polysorbate 20 Medium）论证待测样品里的防腐剂或其它抑菌因子被中和。若产品中含有抑菌物质且产品是可溶性的，则采用“无菌实验（Sterility Tests <71>）”里的“薄膜过滤法 (Membrane Filtration Method)”进行(微生物程度)检测会更适宜（suitable）。在抑菌物质得以适宜中和、稀释液体积大幅度增加后仍不能排除克制因子，以及不适宜用“薄膜过滤法”的状况下，可能会由于产品本身的杀菌作用造成细菌无法生长。当产品不能检测出接种菌种的状况下，应用光谱法拟定产品的抑菌/杀菌成分。...
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