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Tn5转座酶建库原理VIP专享VIP免费

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Tn5 引 爆 极 速 建 库 和 长 片 段 之 战近 10年间,NGS(NextGenerationSequencing)技术高速 发展,测序仪器不断更新迭代,形成规模化。在测序模式产业化的大环境下,测序样本制备成为其中很重要的一环。样本起始量要求过高、建 库 流程繁琐等都会限制 NGS技术的 应 用 。 科 学 家 们 一 直 在 不 断 探 索 , 试 图 突 破 此 类 限 制 , 其 中 转 座 酶(Transposase)技术引 入建 库 中就是很大的进步,不仅解决了上述问题,转座酶也在 NGS上开发了多个技术应用,拓展了 NGS的适用范围。20世纪 40年代,美国遗传学家芭芭拉.麦克林托克在玉米的研究中发现了转座子(Transposon),随后,她花了整整 6年的时间来研究转座子的奥秘。在 50年代,当麦克林托克向世人公布她的发现时,学术界并没有多少人认可,但是真理是经得起时间检验的,随后的几十年间科学家们在生物界各个领域证实了转座子系统的广泛存在。1983年,瑞典皇家科学院诺贝尔奖金评定委员会终于把该年度的生理学和 医学奖授予这位 81岁高龄的、不屈不挠的女科学家。麦克林托克是在遗传学研究领域第一位独立获得诺贝尔奖的女科学家,她的名字将和 转座基因一起被载入科学史册。转座基因俗称跳跃基因,它的发现改变了人们对基因组序列稳定性的认识。理论上的突破也带来了应用上的拓展,科学家们群策群力,将转座子系统开发成基因研究的各种工具,这又反过来促进了遗传学理论的研究。转座子标签(transposontagging)技术是研究功能基因的有效工具之 一。比如模式植物大多都有很好的突变体库 ,其中玉米的两个应用最为广泛的突变体库(uniformMu和 Ac/Ds突变体库 )就是利用转座子创建 的。转座子标签技术克隆基因的基本原理:转座子是染色体上一段 可移动的 DNA片 段 ,它可从染色体的 一 个 位 置 跳 到 另 一 个 位 置 。 当 转 座 子 跳 跃 而 插 入 到 某 个 功 能 基 因 时 , 就 会 引 起该 基 因 的 失 活 , 并 诱 导 产 生 突 变 型 。 通 过 遗 传 分 析 可 确 定 某 基 因 的 突 变 是 否 由 转座 子 引 起 , 由 转 座 子 引 起 的 突 变 便 可 以 转 座 子DNA 为 探 针 , 从 突 变 株 的 基 因 组文 库 中 钓 出 含 该 转 座 子 的DNA 片 段 , 并 获 得 含 有 部 分 突...

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